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一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210545897.7, 申请日期: 2014-01-22, 公开日期: 2014-01-22
发明人:  黄雯;  阙华勇;  许飞;  李莉;  张国范
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一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法  其特征在于:该方法包括如下步骤:1)将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状  2)研磨后进行低温干燥  分成ab两部分分别用于以下步骤  3)将a部分样品准确称量干重后  按固定比例加入0.01mol/l?naoh溶液  4)8000?12000rpm离心5?10min  2?8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素  取上清  5)取步骤4)中的上清  用于定量检测甲状腺激素的含量  即总甲状腺素t4和总3  7)将步骤6)中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量  5  6)将b部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和pmsf室温放置1h以上  3′?三碘甲腺原氨酸t3  裂解细胞释放蛋白  8)将数据整合  计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克  即xg/gprotein。  
一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110416253.3, 申请日期: 2012-06-20, 公开日期: 2012-06-20
发明人:  戚鹏;  张盾;  万逸
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一种水环境中硫酸盐还原菌的检测方法  其特征在于:将待测样品离心后  沉淀于选择性培养基中厌氧条件下培养3?4天  离心取上清液  并加入上清液1/9体积的硝酸锌溶液混合均匀后离心取沉淀  沉淀中加入亚甲基蓝溶液混合均匀后在紫外灯下照射1.5?2.0小时  即可通过吸光度待测样品中检测硫酸盐还原菌。  
一种植物空心胶囊生物等效性评价方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910255701.9, 申请日期: 2011-06-22, 公开日期: 2011-06-22
发明人:  韩丽君;  袁毅;  李敬;  吴佩
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(2)取植物空心胶囊、动物明胶空心胶囊分别充填布洛芬混合物0.25?0.40克  一种植物空心胶囊生物等效性评价方法  其特征在于:(1)按重量比计  布洛芬纯品80?100%、淀粉和/或硬脂酸镁含量为20%的混合物为固定模型药物标准品  制成口服给药药剂  剂量分别为中青年人或动物每次口服1?2粒  (3)分别取服用上述药后20?30分钟中青年人或动物静脉血浆200?250μl  以后每间隔30?120分钟取服药后20?30分钟中青年人或动物静脉血浆200?250μl  直至中青年人或动物服药后10?12小时为止  测定血浆中布洛芬的含量的变化  共需静脉血浆10?16份  (4)分别于各组所取待测血浆加入内标液600?650μl  内标液为浓度10mg/l甲醇的吲哚美辛  以明胶空心胶囊布洛芬胶囊剂为参比计算相对生物利用度  振荡  根据采集志愿者血浆获得的血药浓度?时间数据  12000?18000rpm离心8?12min  用das?2.0计算主要药代动力学参数  取上清  包括峰浓度(Cmax)、达峰时间(Tmax)及平均残留时间(Mrt)  根据生物利用度评价生物等效性  高效液相色谱测定  采用[1?2α]置信区间法分析其生物等效性。  检测波长为220?230nm  
一种对虾肠道微生物DNA的提取方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910263665.0, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2010-06-23
发明人:  刘淮德;  王雷;  刘梅;  王宝杰;  蒋克勇
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一种对虾肠道微生物dna的提取方法  其特征在于:1)将0.01-0.05g对虾肠道在液氮下研磨  2)将洗脱液在200g离心5-10min  并加入0.8-1.2ml?pbs、15-25μl?pvpp匀浆和200-300μl?0.5%tween-80  取上清菌液待用  沉淀中加0.8-1.2ml?pbs以200g离心取上清菌液  3)将步骤2)所得上清菌液以1200g离心5-10min  均匀后吹打洗脱3-5min  将两次离心所得上清菌液合并  收集上清菌液  合并上清液以300g离心5-10min  4)将步骤3)所得上清菌液中加100-150μlctab提取液和10-15μl溶菌酶  取上清菌液待用  放入37℃摇床  而后加15-20μl?20%(W/c)Sds和10-15μl蛋白酶k  振荡30-40min  60-70℃水浴1-2h  5)将水浴后菌液在4℃?3200g离心8-15min  取上清菌液  6)将水浴后菌液以3200g离心8-15min  而后加100-150μl?ctab液和20-25μl?20%sds混匀后  取上清菌液  7)将步骤6)所得上清菌液中加上清菌液体积0.6-0.8倍的异丙醇  涡旋  而后加入与上述上清菌液等体积的酚/氯仿混合液  而后于-20℃静置1-2h  8)将步骤7)所得沉淀中加入600-800μl?70%预冷乙醇  60-70℃水浴10-15min  14000g离心10-15min  再以4℃?14000g离心10-15min  14000g离心10-15min  取上清菌液待用  所得沉淀待用  所得沉淀即为对虾肠道微生物dna。  
一种分离纯化组蛋白H4的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047932.7, 申请日期: 2008-04-02, 公开日期: 2008-04-02
发明人:  李鹏程;  李翠萍;  于华华;  刘 松;  邢荣娥;  郭占勇;  陈晓琳;  冯金华
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1、一种分离纯化组蛋白h4的方法  其特征在于包括以下步骤:(1)提取样品:将50g-150g的海蜇样品破碎  而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min  然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液  取上清液备用  (2)分离纯化:①加样前样品预处理:将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中  放入2℃-6℃下  每隔8-12min搅拌一次  ②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中  浸泡0.5-48hh  共搅拌2-6次  用3-5倍床体积的缓冲液淋洗  ③洗脱:采用含有nacl的缓冲液  而后在相对离心力为573-1467g下  以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱  离心5-10min  收集组分。  弃去上清液  
一种制备海带孢子体大分子量DNA的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410011416.X, 申请日期: 2006-07-12, 公开日期: 2006-07-12
发明人:  段德麟;  王高歌;  胡自民
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1.一种制备海带孢子体大分子量dna的方法  其特征在于:可按如下步骤操作  2)将上述材料置于液氮中  1)取海带孢子体在清水中清洗后  迅速研成粉末  3)将藻粉转入sds提取缓冲液中  放入去多糖溶液中冲洗  63~65℃保温30min  4)加入kac溶液  以去除海带孢子体表面的多糖  混合均匀  5)离心  第二次去多糖  取上清  6)离心  加入氯仿:异戊醇抽提  水相用异丙醇于-18~-20℃沉淀  7)离心  乙醇洗沉淀  稍干后溶于te中  加入rnase  得产品。