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| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋 ; 李富花; 张晓军; 相建海
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进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310235286.7, 申请日期: 2013-10-09, 公开日期: 2013-10-09
发明人: 张成松; 相建海; 李富花; 崔朝霞; 万建军
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一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 （3）基于形态学标记的药物诱导起始时刻的确定：将受精膜举起作为诱导起始时刻的形态学标记 其特征在于：所述方法具体如下：（1）亲蟹的海水驯化：将亲蟹生活的盐度从0提高到18‰ （2）亲蟹标记：将有编码的塑料标签绑缚在雌蟹上 （4）kcl诱导最优参数的确定及应用：通过实验确定kcl诱导中华绒螯蟹三倍体的有效浓度及处理持续时间并加以应用 并在此盐度驯化后开始交配产卵 以标记区分亲蟹个体 （5）药物渗透性增加措施：增加药物与受精卵接触面积 以利于诱导药物的渗透。 |
| 一种明显提高脊尾白虾人工育苗存活率的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210015976.7, 申请日期: 2013-07-24, 公开日期: 2013-07-24
发明人: 张成松; 相建海; 李富花; 于洋
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纱网的孔径以幼体可以自由通过而亲虾不能通过为宜 一种大幅提高脊尾白虾人工育苗出苗量的方法 并于孵化池的亲虾活动区内投放脊尾白虾的抱卵亲虾进行孵化培养 其特征在于：在人工育苗过程中利用幼体趋光性分离并收集脊尾白虾幼体 具体包括如下步骤：(1)孵化池内不同功能区域的分割：在孵化池中部靠近一侧池壁处设置一长条状隔离纱网 利用普通纱网将孵化池隔离为亲虾活动区和幼体收集区两部分 (2)不同功能区域的光照调节：在亲虾活动区的上部架设遮阳网以降低光照强度 在幼体收集区远离亲虾活动区一侧的池壁上部安装日光灯增加光照强度 (3)可升降调节的幼体收集网的制作安装：按照幼体收集区的实际面积大小制作小于幼体收集区水面尺寸的幼体收集网 以尼龙绳将收集网固定在幼体收集区中下层 (4)幼体收集：当幼体培育条件准备完毕 收集网的高度可通过尼龙绳调节 且幼体收集区的幼体密度大于100个幼体/l时 即时(或及时)收集脊尾白虾幼体。 |
| 一种脊尾白虾非繁殖季节人工促熟方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310064005.6, 申请日期: 2013-06-05, 公开日期: 2013-06-05
发明人: 张成松; 相建海; 李富花; 于奎杰
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一种脊尾白虾非繁殖季节人工促熟方法 其特征在于：（1）亲虾的选择及暂养：非繁殖季节 选择已达性成熟规格的亲虾（雌:雄=2‑3:1）放入亲虾培育池中暂养7‑10天 期间保持自然温度、光照周期（视当时自然条件而定） 每天投喂人工配合饵料并及时清污、换水。（2）人工促熟：通过模拟自然条件下春季繁殖起始季节水温逐渐上升、光照周期逐渐延长的特点 利用温度、光照周期调控同时辅以营养强化实现脊尾白虾在非繁殖季节的产卵繁殖 具体调控方法包括水温控制、光照周期调节及营养强化。 |
| 一种累代选育对虾新品种的鉴定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210384634.2, 申请日期: 2013-01-23, 公开日期: 2013-01-23
发明人: 相建海; 于洋; 张晓军; 李富花
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一种对累代选育对虾新品种的鉴定方法 其特征在于：采用线粒体控制区的引物扩增并测序待鉴定群体的线粒体控制区 将扩增所得线粒体控制区序列符合累代选育群体单倍型的待鉴定群体再利用5对微卫星位点引物进行扩增 所述5对微卫星位点引物为：引物名序列引物名序列khv1f5’?ttaccgcctaagagcgaatg?3’khv1r5’?tgtcctttcgtaccagtcaag?3’khv2f5’?gatgtacacaactgtacttcg?3’khv2r5’?gagatgataagagaacgaaag?3’khv3f5’?gagagcaaataagaaagggc?3’khv3r5’?aggatgcaaatgataacgag?3’khv4f5’?cgaagagatttatccaggg?3’khv4r5’?cgtgcattattatcctttcc?3’khv5f5’?atgctgcatcatctctgac?3’khv5r5’?aggaaaagacggtgaaatag?3’ 将扩增所的产物进行微卫星分型 而后利用微卫星分型数据进行判别分析 进而得到累代选育对虾新品种 |
| 一种凡纳滨对虾热休克蛋白基因启动子 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110341708.X, 申请日期: 2012-10-31, 公开日期: 2012-10-31
发明人: 相建海; 赵翠; 郇聘; 张晓军; 李富花
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(2)与序列表中seq?id?no.1限定的dna序列具有80％以上同源性的dna序列 一种凡纳滨对虾热休克蛋白基因启动子 其特征在于：凡纳滨对虾热休克蛋白基因启动子为下述任一项：(1)凡纳滨对虾热休克蛋白基因启动子为序列表中seq?id?no.1碱基序列 (3)是seq?id?no.1的片段、遗传变体或缺失体 且能够控制下游基因转录的dna分子。 |
| 一种栉孔扇贝热休克蛋白基因启动子 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110334969.9, 申请日期: 2012-10-31, 公开日期: 2012-10-31
发明人: 相建海; 赵翠; 郇聘; 张晓军; 李富花
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(2)与序列表中seq?id?no.1限定的dna序列具有80％以上同源性的dna序列 一种栉孔扇贝热休克蛋白基因启动子 其特征在于：栉孔扇贝热休克蛋白基因启动子为下述任一项：(1)栉孔扇贝热休克蛋白基因启动子为序列表中seq?id?no.1碱基序列 (3)是序列表中seq?id?no.1的片段、遗传变体或缺失体 且能控制下游基因转录的dna分子。 |
| 一种鳗弧菌快速检测试剂盒及其检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015289.9, 申请日期: 2008-11-19, 公开日期: 2008-11-19
发明人: 高宏伟; 相建海; 李富花; 莫照兰
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1.一种鳗弧菌快速检测试剂盒 上游内引物5-gcatgatggcgcagcaaatttaaccgcctgcttttgttc-3、下游内引物5-cgtaaacttggccgatacctttctttaccggtctttaata Cgtcag-3、上游外引物5-ggtaatgcgtaagtgcaata-3、下游外引物5-ccagcagatgtatcatggt-3。 其特征在于：1-2ml环介导等温扩增反应液a、0.5-1.5u/μl Ung酶、6-10u/μl Bstdna聚合酶b和1-3μl显色剂c 其中 每升环介导等温扩增反应液a含1-2ml 10×thermopol反应缓冲液、300-500μmoldntp、2-4mmol硫酸镁、0.8-1.2μmol上游内引物、0.8-1.2μmol下游内引物、0.2-0.3μmol上游外引物、0.2-0.3μmol下游外引物和1-1.5mol甜菜碱 |
| 对虾白斑综合症病毒快速检测试剂盒的制备和检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810015290.1, 申请日期: 2008-11-19, 公开日期: 2008-11-19
发明人: 高宏伟; 相建海; 李富花
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1.一种对虾白斑综合症病毒快速检测试剂盒 上游内引物5-accacctttggcgcaccaatcgtgcacgtacatgtcga-3、下游内引物5-accacacacaaaggtgccaactctttgtcggtagctccaaca-3、上游外引物5-ggtctcagtgccagagtagg-3、下游外引物5-tggtgccaaagattaaccca-3。 其特征在于：1-2ml环介导等温扩增反应液a、0.5-1.5u/μl Ung酶、6-10u/μl Bstdna聚合酶b和1-3μl显色剂c 其中 每升环介导等温扩增反应液a含1-2ml 10×thermopol反应缓300-500μmol Dntp、2-4mmol硫酸镁、0.8-1.2μmol上游内引物、0.8-1.2μmol下游内引物、0.2-0.3μmol上游外引物、0.2-0.3μmol下游外引物和1-1.5mol甜菜碱 |
| 三倍体单体牡蛎规模化培育方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610046697.1, 申请日期: 2007-11-28, 公开日期: 2007-11-28
发明人: 张志怀; 相建海; 董波; 刘保忠
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2)获卵和三倍体产生：利用四倍体与二倍体母本杂交生产100％的三倍体 权利要求书1.三倍体单体牡蛎规模化培育方法 其特征在于：1)亲贝培育：包括二倍体和四倍体亲贝的培育 3)幼体培育：受精卵孵出后 幼虫经18-20天即出现眼点和足 4)无附着变态：首先滤出健康的眼点幼虫 生长到眼点期幼虫 然后可利用肾上腺素处理、贝壳粉加下降流设备实现无附着变态 实现三倍体的单体培育 幼虫变态后 5)上升流培养：稚贝经过变态附着后进入上升流培养系统 生产长度达到0.25-0.35mm的稚贝 培养15±2天 6)下降流培养：培养8-12天 稚贝生长到1.95-2.05mm 稚贝生长到4-6mm 7)室外暂养：稚贝培养到5mm左右后 转移到室外暂养池 8)潮间带筏式养殖：养殖期8-10个月 在自然环境条件下培育27-33天 个体生长到7～8cm即可收获。 稚贝生长到1.3-1.7cm 后进行三倍体单体牡蛎养殖 |
