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| 利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210339467.X, 申请日期: 2014-03-26, 公开日期: 2014-03-26
发明人: 单体锋; 逄少军; 高素芹
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一种利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法 其特征在于：1）将雌性配子体进行诱导培养至幼孢子体达到1mm以上转入充气培养条件下 2）将上述孤雌生殖成熟的孢子体的孢子叶置于海水中释放得到游孢子 4）将雄配子体与附着在苗帘上的雌配子在50?80μmol?photonsm?2s?1光强下完成发育和受精过程 完成孤雌生殖孢子体的生活史 待释放得到游孢子的海水颜色为黄褐色后 3）上述附着游孢子的苗帘在光强50?80μmol?photons?m?2s?1 形成孤雌生殖成熟的孢子体 将游孢子附着在苗帘上 水温18－22℃ 待幼孢子体达到200?500μm左右 而后将苗帘放入新鲜海水中 光周期12h白天：12h黑夜条件下培养13?15d 转到海上栽培 待萌发的游孢子全部发育成雌配子体并充分生长后 即实现裙带菜的培育。 降低光强至2?10μmol?photons?m?2s?1 延缓配子体的发育使其度过高水温的夏季 |
| 一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310517084.1, 申请日期: 2014-02-05, 公开日期: 2014-02-05
发明人: 刘清华; 李军; 韩龙江; 肖志忠; 孔宁
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一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 其特征在于：a.优质亲鲍的选择 B.亲鲍阴干刺激 选择自然海区人工养殖的性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍或将由自然海区人工养殖的雄性亲鲍经暂养性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍 将雄性亲鲍从暂养池中捞出 c.将上述阴干刺激后的雄性亲鲍置于经紫外线照射过并升温至20?21℃的海水中 腹面朝上避光阴干刺激1.5?2小时 于黑暗环境下刺激0.5?1小时 D.将上述收集的精子离心收集浑浊液 直至排精 即得皱纹盘鲍精子。 |
| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋; 李富花; 张晓军; 相建海
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进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架 专利
专利类型: 实用新型, 专利号: CN201320245231.X, 申请日期: 2013-10-30, 公开日期: 2013-10-30
发明人: 刘清华; 李军; 柳意樊; 徐世宏
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一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架 其特征在于：包括一体式框架(1)和托盘(2) 当托盘(2)不悬挂冻存管时 其中一体式框架(1)为一侧开放式结构 在一体式框架(1)的开口侧或与开口侧相对的另一侧抽取托盘(2)。 所述一体式框架(1)上沿高度方向设有多个托盘(2) 各托盘(2)均水平放置、并相互平行 所述托盘(2)上布设有多个用于悬挂冻存管的孔 当托盘(2)悬挂冻存管时 在一体式框架(1)的开口侧抽取托盘 |
| 一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 肖志忠; 韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 其特征在于：将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合 抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中 添加剂：蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄（v/v）。 混合后经过两步降温处理 稀释液为nacl8g/l 抗冻剂为终浓度60%（v/v）的dmso（二甲基亚砜）或终浓度60%（v/v） 一步平衡后投入到液氮（‑196℃） Kcl0.4g/l 的丙二醇（pg） 分装保存 Mgso4·7h2o0.1g/l Mgcl2·6h2o0.1g/l Na2hpo4·2h2o0.06g/l Kh2po40.06g/l Nahco30.35g/l |
| 一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 其特征在于：将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻 其中 溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液 稀释液为nacl 离心收集沉淀 Kh2po4和水组成。 而后与牙鲆卵子进行人工授精 |
| 一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310235286.7, 申请日期: 2013-10-09, 公开日期: 2013-10-09
发明人: 张成松; 相建海; 李富花; 崔朝霞; 万建军
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一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 （3）基于形态学标记的药物诱导起始时刻的确定：将受精膜举起作为诱导起始时刻的形态学标记 其特征在于：所述方法具体如下：（1）亲蟹的海水驯化：将亲蟹生活的盐度从0提高到18‰ （2）亲蟹标记：将有编码的塑料标签绑缚在雌蟹上 （4）kcl诱导最优参数的确定及应用：通过实验确定kcl诱导中华绒螯蟹三倍体的有效浓度及处理持续时间并加以应用 并在此盐度驯化后开始交配产卵 以标记区分亲蟹个体 （5）药物渗透性增加措施：增加药物与受精卵接触面积 以利于诱导药物的渗透。 |
| 一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214338.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 王文琪; 徐世宏; 韩龙江
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一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 其特征在于：1）冷冻保存：将活力高于85%的夏鲆精子与抗冻液以1:3‑1:2的体积比混合 2）解冻：将上述冻存冻精于亲鱼车间的循环水中即可解冻 混合后置于容器内再一并移入液氮罐内进行一步预冷 待冻精由固态融化为液态置于0‑4℃冰箱中保存备用。 两步冷冻 而后投入液氮中进行长期保存 |
| 一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成 其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合 处理后投入到液氮（‑196℃） 在0℃孵育6‑8分钟 分装保存 抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油） 孵育后以分段方式降温处理 其中 稀释液为100mm蔗糖 100mm khco3 添加剂：5mm还原型谷胱甘肽 25mm nahco3 50mm牛磺酸 10%蛋黄（v/v）。 |
| 太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 于道德; 官曙光
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孵育后以分段方式降温处理 一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 其特征在于：将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合 混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟 处理后投入到液氮（‑196℃） 抗冻剂为终浓度10%（v/v）的丙二醇（pg） 分装保存 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成 添加剂为：终浓度5%（v/v）的蛋黄和终浓度5%bsa（v/v）。 其中稀释液为：nacl 8g/l Na2hpo4·2h2o0.6g/l Kh2po40.6g/l 海藻糖37.8g/l |
