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| 一种纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒（WSSV）的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310302179.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 相建海 ; 谢世筠; 李富花
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一种纯化fitc标记的虾白斑综合症病毒（wssv）的方法 其特征在于：将经fitc标记的虾白斑综合症病毒混合液利用分子筛柱进行纯化 收集含有fitc标记的wssv的洗脱液 即得到纯化的可视化wssv 其中 分子筛柱填料为g‑25m 洗脱液为pbs缓冲液。 |
| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋; 李富花; 张晓军; 相建海
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进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 波浪对海洋表层Ekman 流和上层混合的影响研究 学位论文
, 北京: 中国科学院研究生院, 2013
作者: 徐俊丽
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波浪 Ekman 流解 风输入与波耗散 海洋上层混合 My2.5 阶湍 封闭模式 |
| 一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架 专利
专利类型: 实用新型, 专利号: CN201320245231.X, 申请日期: 2013-10-30, 公开日期: 2013-10-30
发明人: 刘清华; 李军; 柳意樊; 徐世宏
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一种鱼类精子批量超低温冷冻保存多层架 其特征在于：包括一体式框架(1)和托盘(2) 当托盘(2)不悬挂冻存管时 其中一体式框架(1)为一侧开放式结构 在一体式框架(1)的开口侧或与开口侧相对的另一侧抽取托盘(2)。 所述一体式框架(1)上沿高度方向设有多个托盘(2) 各托盘(2)均水平放置、并相互平行 所述托盘(2)上布设有多个用于悬挂冻存管的孔 当托盘(2)悬挂冻存管时 在一体式框架(1)的开口侧抽取托盘 |
| 一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 肖志忠; 韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 其特征在于：将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合 抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中 添加剂：蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄（v/v）。 混合后经过两步降温处理 稀释液为nacl8g/l 抗冻剂为终浓度60%（v/v）的dmso（二甲基亚砜）或终浓度60%（v/v） 一步平衡后投入到液氮（‑196℃） Kcl0.4g/l 的丙二醇（pg） 分装保存 Mgso4·7h2o0.1g/l Mgcl2·6h2o0.1g/l Na2hpo4·2h2o0.06g/l Kh2po40.06g/l Nahco30.35g/l |
| 一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 其特征在于：将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻 其中 溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液 稀释液为nacl 离心收集沉淀 Kh2po4和水组成。 而后与牙鲆卵子进行人工授精 |
| 一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310235286.7, 申请日期: 2013-10-09, 公开日期: 2013-10-09
发明人: 张成松; 相建海; 李富花; 崔朝霞; 万建军
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一种中华绒螯蟹三倍体诱导新方法 （3）基于形态学标记的药物诱导起始时刻的确定：将受精膜举起作为诱导起始时刻的形态学标记 其特征在于：所述方法具体如下：（1）亲蟹的海水驯化：将亲蟹生活的盐度从0提高到18‰ （2）亲蟹标记：将有编码的塑料标签绑缚在雌蟹上 （4）kcl诱导最优参数的确定及应用：通过实验确定kcl诱导中华绒螯蟹三倍体的有效浓度及处理持续时间并加以应用 并在此盐度驯化后开始交配产卵 以标记区分亲蟹个体 （5）药物渗透性增加措施：增加药物与受精卵接触面积 以利于诱导药物的渗透。 |
| 一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214338.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 王文琪; 徐世宏; 韩龙江
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一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 其特征在于：1）冷冻保存：将活力高于85%的夏鲆精子与抗冻液以1:3‑1:2的体积比混合 2）解冻：将上述冻存冻精于亲鱼车间的循环水中即可解冻 混合后置于容器内再一并移入液氮罐内进行一步预冷 待冻精由固态融化为液态置于0‑4℃冰箱中保存备用。 两步冷冻 而后投入液氮中进行长期保存 |
| 一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成 其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合 处理后投入到液氮（‑196℃） 在0℃孵育6‑8分钟 分装保存 抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油） 孵育后以分段方式降温处理 其中 稀释液为100mm蔗糖 100mm khco3 添加剂：5mm还原型谷胱甘肽 25mm nahco3 50mm牛磺酸 10%蛋黄（v/v）。 |
| 太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 于道德; 官曙光
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孵育后以分段方式降温处理 一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 其特征在于：将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合 混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟 处理后投入到液氮（‑196℃） 抗冻剂为终浓度10%（v/v）的丙二醇（pg） 分装保存 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成 添加剂为：终浓度5%（v/v）的蛋黄和终浓度5%bsa（v/v）。 其中稀释液为：nacl 8g/l Na2hpo4·2h2o0.6g/l Kh2po40.6g/l 海藻糖37.8g/l |
