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| 扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409878.6, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 宋林生; 邱丽梅; 刘瑞; 张峘
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一种扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus的快速检测方法 其特征在于：以待检测的过滤海水样品中细菌基因组总dna为模版 其中所述的引物为：16s rdna：上游引物16srtf：5’‑agaaccttacctactcttgacatcc‑3’ 利用细菌16srdna保守区域和致病性灿烂弧菌金属蛋白酶基因的特异性的引物进行荧光定量pcr扩增和定量分析检测养殖环境中扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus 下游引物16srtr：5’‑cccaacatttcacaacacga‑3’ 金属蛋白酶基因：上游引物spf1：5’‑atggcacaagggatcagcgg‑3’ 下游引物spf2：5’‑ggataagaggaagcgataaagaa‑3’。 |
| 一种白僵菌AS-70菌株及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210512308.5, 申请日期: 2013-04-17, 公开日期: 2013-04-17
发明人: 王斌贵 ; 杜丰玉
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一种白僵菌as??70菌株 其特征在于：白僵菌as??70（beauveria??felina）保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心 保藏日期：2012年9月29日 保藏号为：cgmcc??6643。 |
| 不同性状海带配子体的鉴定方法及可采用的部分DNA序列 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200310105037.2, 申请日期: 2008-07-30, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 段德麟; 胡自民; 赫英俊
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| 经济海藻紫菜种质资源鉴定的方法及部分DNA序列 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200310105036.8, 申请日期: 2008-07-30, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 段德麟; 胡自民; 赫英俊
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| 一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410020770.9, 申请日期: 2005-12-21, 公开日期: 2005-12-21
发明人: 王广策; 张宝玉
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1.一种现场快速定性鉴定赤潮微藻的方法 2)探针的标记：按常规方法对所选探针进行标记 其特征在于：1)探针的确定：从已知的赤潮藻目的序列中寻找高度特异的dna序列作为探针 采用赤潮藻核糖体大亚基rdna序列和核糖体大小亚基之间的转录单元间隔区its作为目的序列 或以its序列设计探针 或在这些目的片段中寻找高度特异的dna序列作为探针 3)固定赤潮藻细胞并裂解：离心收集藻细胞 加固定液mse固定 4)杂交：将含有探针的杂交液加到有固定细胞的载玻片上 将用固定液固定后的赤潮藻细胞固定在载玻片上干燥 进行杂交反应 5)冲洗、滴加抗体、干燥后封片 荧光显微镜检测。 |
| 龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200410021012.9, 申请日期: 2005-07-20, 公开日期: 2005-07-20
发明人: 段德麟; 李文红; 胡自民
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1.龙须菜选育品系和野生型及相关种鉴定的方法 其特征在于：龙须菜的rdnaits全序列的获取 提取缓冲液的组成为：100mmoll-1tris.hcl 步骤如下：(1)总dna提取：取新鲜健康的藻体材料 Ph8.0 (2)Pcr扩增：龙须菜its区扩增的特异引物p1、p2的序列分别为：p1：5’gggatccgtttccgtaggtgaacctgc3’ 用无菌水处理后 50-100mmoll-1edta 位于18s上 P2：5’gggatccatatgcttaagttcagcgggt3’ (3)Pcr产物纯化 在液氮种研磨成粉末 0.2-0.5mnacl 位于26s上 利用该引物对步骤(1)提取的dna为模板 提取总dna 5％β-巯基乙醇 对总dna进行pcr扩增反应 0.2％pvp-40 (4)Dna序列测定：纯化后的dna进行序列测定 1.0-2.5％sds 确立rdnaits区 (5)Dna序列数据分析：待分析的rdnaits区的序列一经测定 提取所用的kac浓度为4.0-5.0m 包括its1和5.8s区的全序列 用对位排列软件clustalw进行对位排列 建立用于鉴别龙须菜种内和种间差异的rapd和issr特异指纹图谱 Ph值范围在5.2-7.5 并辅以人工校对 步骤如下：1)总dna提取 2)Rapd和issr引物的合成 用系统进化分析各样品dna序列与数据库中各个序列间的差异 从大量随机引物中筛选出能稳定的扩增出特征条带的引物 3)根据扩增条带的多态性 构建龙须菜选育品系及野生型和相关种的rapd和issr特异指纹图谱。 |
