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| 一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310517084.1, 申请日期: 2014-02-05, 公开日期: 2014-02-05
发明人: 刘清华; 李军; 韩龙江; 肖志忠; 孔宁
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一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 其特征在于：a.优质亲鲍的选择 B.亲鲍阴干刺激 选择自然海区人工养殖的性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍或将由自然海区人工养殖的雄性亲鲍经暂养性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍 将雄性亲鲍从暂养池中捞出 c.将上述阴干刺激后的雄性亲鲍置于经紫外线照射过并升温至20?21℃的海水中 腹面朝上避光阴干刺激1.5?2小时 于黑暗环境下刺激0.5?1小时 D.将上述收集的精子离心收集浑浊液 直至排精 即得皱纹盘鲍精子。 |
| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋; 李富花; 张晓军; 相建海
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进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人: 刘清华; 李军; 肖志忠; 韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 其特征在于：将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合 抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中 添加剂：蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄（v/v）。 混合后经过两步降温处理 稀释液为nacl8g/l 抗冻剂为终浓度60%（v/v）的dmso（二甲基亚砜）或终浓度60%（v/v） 一步平衡后投入到液氮（‑196℃） Kcl0.4g/l 的丙二醇（pg） 分装保存 Mgso4·7h2o0.1g/l Mgcl2·6h2o0.1g/l Na2hpo4·2h2o0.06g/l Kh2po40.06g/l Nahco30.35g/l |
| 一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 徐世宏; 韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成 其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合 处理后投入到液氮（‑196℃） 在0℃孵育6‑8分钟 分装保存 抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油） 孵育后以分段方式降温处理 其中 稀释液为100mm蔗糖 100mm khco3 添加剂：5mm还原型谷胱甘肽 25mm nahco3 50mm牛磺酸 10%蛋黄（v/v）。 |
| 太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人: 刘清华; 李军; 于道德; 官曙光
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孵育后以分段方式降温处理 一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 其特征在于：将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合 混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟 处理后投入到液氮（‑196℃） 抗冻剂为终浓度10%（v/v）的丙二醇（pg） 分装保存 所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成 添加剂为：终浓度5%（v/v）的蛋黄和终浓度5%bsa（v/v）。 其中稀释液为：nacl 8g/l Na2hpo4·2h2o0.6g/l Kh2po40.6g/l 海藻糖37.8g/l |
| 一种累代选育对虾新品种的鉴定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210384634.2, 申请日期: 2013-01-23, 公开日期: 2013-01-23
发明人: 相建海; 于洋; 张晓军; 李富花
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一种对累代选育对虾新品种的鉴定方法 其特征在于：采用线粒体控制区的引物扩增并测序待鉴定群体的线粒体控制区 将扩增所得线粒体控制区序列符合累代选育群体单倍型的待鉴定群体再利用5对微卫星位点引物进行扩增 所述5对微卫星位点引物为：引物名序列引物名序列khv1f5’?ttaccgcctaagagcgaatg?3’khv1r5’?tgtcctttcgtaccagtcaag?3’khv2f5’?gatgtacacaactgtacttcg?3’khv2r5’?gagatgataagagaacgaaag?3’khv3f5’?gagagcaaataagaaagggc?3’khv3r5’?aggatgcaaatgataacgag?3’khv4f5’?cgaagagatttatccaggg?3’khv4r5’?cgtgcattattatcctttcc?3’khv5f5’?atgctgcatcatctctgac?3’khv5r5’?aggaaaagacggtgaaatag?3’ 将扩增所的产物进行微卫星分型 而后利用微卫星分型数据进行判别分析 进而得到累代选育对虾新品种 |
| 一种海湾扇贝的同代多点复合选育方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414942.0, 申请日期: 2012-04-11, 公开日期: 2012-04-11
发明人: 张守都; 张国范; 李莉
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一种海湾扇贝的同代多点复合选育方法 其特征在于：将海湾扇贝一个世代内的各不同生长期的扇贝进行连续壳长截头上选 进而实现在一个世代内的连续多点复合选育。 |
| 一种牙鲆精子大容量冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910231457.2, 申请日期: 2010-05-19, 公开日期: 2010-05-19
发明人: 刘清华; 肖志忠; 李军
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一种牙鲆精子大容量冷冻保存方法 其特征在于：采集牙鲆精液后 放入冻存管添加抗冻液 在0～4℃预冷9～11分钟 分段降温至-180℃后投入液氮中保存。 |
| 一种中华绒螯蟹多元高通量遗传标记系统及遗传分析方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910020751.9, 申请日期: 2009-12-30, 公开日期: 2009-12-30
发明人: 崔朝霞; 王鸿霞; 吴丹华; 刘 媛; 李倩倩
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1.一种中华绒螯蟹多元高通量遗传标记系统 R：caccagaaataatgaggttt) 其特征在于：所述多元高通量遗传标记系统为线粒体序列信息系统和微卫星分子标记系统 系统1由7个est-ssr标记组成 Ne12(F：atgacattgatgcctgacg 其中微卫星分子标记系统为由7个est-ssr标记的系统1和6个est-ssr标记的系统2组成 扩增7个est-ssr标记的7对引物分别是ne5(F：cgtgaatgctgtagtgtaat R：tgcctttattgaccgagac) Ne16(F：tttcacatcctccacagaca R：gccacaagtacacccaatca) Ne27(F：acgggaaatggaacagat R：tccttccatcctgagtcc) Ne46(F：actgctgttgttggtggtc R：ccttaatccgttgcgtca) Ne48(F：aaaggtcagttaatttcttgat R：tctagtgaaatgacatattggt) Ne49(F：agaccgctgttatgctcct R：atgggaatgaaggttatgtatg) R：cagagccacaacactaacg) 系统2由6个est-ssr标记组成 Ne18(F：tattcaacatttcaacaacgat 扩增6个est-ssr标记的6对引物分别是ne1(F：cattccaagtcttgacccc R：gacgagcgaagaactgga) Ne23(F：agaggcaaatgcgataaaga R：cacgacagacttaccagcac) Ne25(F：aggaggtgcgtaagagtga R：tttccttccatcctgagtc) Ne26(F：acgggaaatggaacagat R：tccttccatcctgagtcc) Ne36(F：atgtggactgcgggaga R：gtggtggtaggttcgtctgt)。 |
| 一种三疣梭子蟹多元高通量遗传标记系统及遗传分析方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910015428.2, 申请日期: 2009-10-28, 公开日期: 2009-10-28
发明人: 崔朝霞; 王鸿霞; 谭 烽; 刘 媛; 吴丹华
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1.一种三疣梭子蟹多元高通量遗传标记系统 R：gtcttccactcccttactgt) 其特征在于：所述多元高通量遗传标记系统为线粒体序列信息系统和微卫星分子标记系统 系统1由7个ssr标记组成 P04(F：gccactatcttgctgaggttga 其中微卫星分子标记系统为由7个ssr标记的系统1和6个ssr标记的系统2组成 扩增7个ssr标记的7对引物分别是e13(F：aaggaggaggctttgatatg R：gccatagcacgaacacttttga) E20(F：cctcagggcagctctggat R：cccggactaggtgacaggtt) E24(F：aactatgggtcctgagtatta R：ctcggtttctgtccactt) C13(F：ctgtctgatgagtgaggctac R：tgaccacgaggaaaggag) C31(F：tataagggcttaagtgtacg R：gatctaaactcaaggcaaaa) H4(F：aatcacttcactacacctttt R：cttgatgggtggcagtct) R：acaagatccttcgtggtggg) 系统2由6个ssr标记组成 E18(F：ccacaactgcaaacacct 扩增6个ssr标记的6对引物分别是e9(F：tactgagacgccgctggtta R：ttggcattttcatcacttac) E28(F：cgttactgaaagagtggtgaa R：gcagaggttgtaccaccg) C14(F：agtgagattaacgcaact R：catctttcattacaggga) H13(F：atgggcaagcctcttaatgt R：ggatcttcgggtaggactga) E17(F：ataaatatcttggaagccctca R：acgccacatagaacactcactc)。 |
