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一种含有未甲基化CpG的DNA序列(CpG-DNA)及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310479972.9, 申请日期: 2014-02-05, 公开日期: 2014-02-05
发明人:  孙黎;  周志侠;  孙铂光
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一种含有未甲基化cpg的dna序列  其特征在于:含有未甲基化cpg的dna序列(cpg?dna)为牙鲆中具有免疫刺激效应的cpg?dna序列  由序列表seq?id?no.1中的碱基序列所示。  
扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409878.6, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  宋林生;  邱丽梅;  刘瑞;  张峘
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一种扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus的快速检测方法  其特征在于:以待检测的过滤海水样品中细菌基因组总dna为模版  其中所述的引物为:16s rdna:上游引物16srtf:5’‑agaaccttacctactcttgacatcc‑3’  利用细菌16srdna保守区域和致病性灿烂弧菌金属蛋白酶基因的特异性的引物进行荧光定量pcr扩增和定量分析检测养殖环境中扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus  下游引物16srtr:5’‑cccaacatttcacaacacga‑3’  金属蛋白酶基因:上游引物spf1:5’‑atggcacaagggatcagcgg‑3’  下游引物spf2:5’‑ggataagaggaagcgataaagaa‑3’。  
一种抑食金球藻的快速检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409553.8, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  宋林生;  邱丽梅;  刘瑞;  张清春;  张峘
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一种抑食金球藻的快速检测方法  其特征在于:利用抑食金球藻的特异性的引物和探针通过荧光定量pcr扩增及其荧光信号对海水中的抑食金球藻进行检测  其中  特异性的引物和探针分别为:上游引物7365f5‘‑gcggaggtcgtggagagg‑3’  下游引物7366r5‘‑gggtgcgtccgtagacttga‑3’  探针:5‘‑ctcggcttcacgggcggcttcc‑3’。  
进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  于洋;  李富花;  张晓军;  相建海
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进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系  包括多重微卫星引物体系  其特征在于:使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系  所述的两个多重微卫星引物体系如下:1)多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为:lvm1f:6‑fam(羧基荧光素)‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox(羧基x罗丹明)‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam(羧基荧光素)‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox(羧基x罗丹明)‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam(羧基荧光素)‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox(羧基x罗丹明)‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2)多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下:lvm11f:6‑fam(羧基荧光素)‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox(羧基x罗丹明)‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam(羧基荧光素)‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。  
栉孔扇贝肽聚糖识别蛋白(CfPGRP-S1)的应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310192697.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  宋林生;  刘瑞;  邱丽梅;  衣启麟;  张峘
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一种栉孔扇贝肽聚糖识别蛋白(cfpgrp‑s1)的应用  其特征在于:序列表seq id no.1中氨基酸序列的栉孔扇贝肽聚糖识别蛋白cfpgrp‑s1重组表达进而可作为wssv病毒的免疫增强剂或添加剂。  
一种利用鳗弧菌鞭毛蛋白的疫苗及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210371870.0, 申请日期: 2013-03-27, 公开日期: 2013-03-27
发明人:  孙黎;  贾盼盼
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所述引物为f1:5’‑cccgggatgcctaaggagatcaatatg‑3’  一种利用鳗弧菌鞭毛蛋白的疫苗  R1:5’‑cccgggacccaatagactaagagct‑3’。  其特征在于:以鳗弧菌为模板  F1/r1为引物所得pcr扩增产物与载体pet259连接  连接转化后质粒经裂解与佐剂混合  即得到利用鳗弧菌鞭毛蛋白的疫苗  
一种耐热的重组别藻蓝蛋白β亚基突变体 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210436631.9, 申请日期: 2013-02-27, 公开日期: 2013-02-27
发明人:  陈华新;  姜鹏;  李富超;  林瀚智
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一种耐热的重组别藻蓝蛋白β亚基突变体  其特征在于:所述突变体为野生型嗜热藻(thermosynechococcus elongtus bp‑1)别藻蓝蛋白β亚基(holo‑apcb)的43位、45位和143位中的一种或几种位点的突变。  
一种累代选育对虾新品种的鉴定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210384634.2, 申请日期: 2013-01-23, 公开日期: 2013-01-23
发明人:  相建海;  于洋;  张晓军;  李富花
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一种对累代选育对虾新品种的鉴定方法  其特征在于:采用线粒体控制区的引物扩增并测序待鉴定群体的线粒体控制区  将扩增所得线粒体控制区序列符合累代选育群体单倍型的待鉴定群体再利用5对微卫星位点引物进行扩增  所述5对微卫星位点引物为:引物名序列引物名序列khv1f5’?ttaccgcctaagagcgaatg?3’khv1r5’?tgtcctttcgtaccagtcaag?3’khv2f5’?gatgtacacaactgtacttcg?3’khv2r5’?gagatgataagagaacgaaag?3’khv3f5’?gagagcaaataagaaagggc?3’khv3r5’?aggatgcaaatgataacgag?3’khv4f5’?cgaagagatttatccaggg?3’khv4r5’?cgtgcattattatcctttcc?3’khv5f5’?atgctgcatcatctctgac?3’khv5r5’?aggaaaagacggtgaaatag?3’  将扩增所的产物进行微卫星分型  而后利用微卫星分型数据进行判别分析  进而得到累代选育对虾新品种  
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
发明人:  卢霞;  王鸿霞;  刘保忠
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一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法  gc含量为40%?60%  包括微卫星位点来源、引物设计、引物优化和微卫星标记家系鉴定体系  2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件primer?premier?5.0设计引物  退火温度为45?65℃  其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组dna利用提取的dna  引物设计条件为:引物长度为19?25mer  预期pcr产物长度为100?400bp  采用限制性内切酶法获得文蛤基因组dna片段  并构建微卫星磁珠富集文库  检测阳性克隆  3)引物优化:根据不同引物的tm值进行温度梯度优化  经测序得到含有微卫星重复的dna序列  在tm值上下各10℃  4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)衡量  温度梯度优化扩增得到的pcr产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?eb染色系统进行检测  根据上述优化获得的ta值  选取杂带较少、特异性产物亮度较高的pcr反应对应的温度为该引物的最佳退火温度ta  选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)进而衡量多态性信息  根据pic值  Pic小于0.25的标记  筛选得到重复性好、稳定性好  Pic值大于0.25的位点  作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系  用于文蛤的家系区分与个体识别。  
一种BAC DNA指纹分析的标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010280134.5, 申请日期: 2012-04-04, 公开日期: 2012-04-04
发明人:  相建海;  张晓军;  郇聘;  赵翠;  李富花;  王兵
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一种bac?dna指纹分析的标记方法  其特征在于:1)将bac?dna样品采用限制性内切酶进行酶切  2)采用一种荧光标记的dutp和taq?dna聚合酶对酶切后的bac?dna片段进行标记  得酶切的bac?dna片段  然后即可用于abi测序仪上进行dna片段分析。