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利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210339467.X, 申请日期: 2014-03-26, 公开日期: 2014-03-26
发明人:  单体锋;  逄少军;  高素芹
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一种利用孤雌生殖进行裙带菜种苗培育的方法  其特征在于:1)将雌性配子体进行诱导培养至幼孢子体达到1mm以上转入充气培养条件下  2)将上述孤雌生殖成熟的孢子体的孢子叶置于海水中释放得到游孢子  4)将雄配子体与附着在苗帘上的雌配子在50?80μmol?photonsm?2s?1光强下完成发育和受精过程  完成孤雌生殖孢子体的生活史  待释放得到游孢子的海水颜色为黄褐色后  3)上述附着游孢子的苗帘在光强50?80μmol?photons?m?2s?1  形成孤雌生殖成熟的孢子体  将游孢子附着在苗帘上  水温18-22℃  待幼孢子体达到200?500μm左右  而后将苗帘放入新鲜海水中  光周期12h白天:12h黑夜条件下培养13?15d  转到海上栽培  待萌发的游孢子全部发育成雌配子体并充分生长后  即实现裙带菜的培育。  降低光强至2?10μmol?photons?m?2s?1  延缓配子体的发育使其度过高水温的夏季  
一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310517084.1, 申请日期: 2014-02-05, 公开日期: 2014-02-05
发明人:  刘清华;  李军;  韩龙江;  肖志忠;  孔宁
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一种皱纹盘鮑精优质精子诱导和采集方法  其特征在于:a.优质亲鲍的选择  B.亲鲍阴干刺激  选择自然海区人工养殖的性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍或将由自然海区人工养殖的雄性亲鲍经暂养性腺饱满并呈乳白、淡黄色雄性亲鲍  将雄性亲鲍从暂养池中捞出  c.将上述阴干刺激后的雄性亲鲍置于经紫外线照射过并升温至20?21℃的海水中  腹面朝上避光阴干刺激1.5?2小时  于黑暗环境下刺激0.5?1小时  D.将上述收集的精子离心收集浑浊液  直至排精  即得皱纹盘鲍精子。  
一种纯化FITC标记的虾白斑综合症病毒(WSSV)的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310302179.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  相建海;  谢世筠;  李富花
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一种纯化fitc标记的虾白斑综合症病毒(wssv)的方法  其特征在于:将经fitc标记的虾白斑综合症病毒混合液利用分子筛柱进行纯化  收集含有fitc标记的wssv的洗脱液  即得到纯化的可视化wssv  其中  分子筛柱填料为g‑25m  洗脱液为pbs缓冲液。  
扇贝致病性灿烂弧菌Vibrio splendidus的快速检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310409878.6, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人:  宋林生;  邱丽梅;  刘瑞;  张峘
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一种扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus的快速检测方法  其特征在于:以待检测的过滤海水样品中细菌基因组总dna为模版  其中所述的引物为:16s rdna:上游引物16srtf:5’‑agaaccttacctactcttgacatcc‑3’  利用细菌16srdna保守区域和致病性灿烂弧菌金属蛋白酶基因的特异性的引物进行荧光定量pcr扩增和定量分析检测养殖环境中扇贝致病性灿烂弧菌vibrio splendidus  下游引物16srtr:5’‑cccaacatttcacaacacga‑3’  金属蛋白酶基因:上游引物spf1:5’‑atggcacaagggatcagcgg‑3’  下游引物spf2:5’‑ggataagaggaagcgataaagaa‑3’。  
一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法  其特征在于:将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻  其中  溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液  稀释液为nacl  离心收集沉淀  Kh2po4和水组成。  而后与牙鲆卵子进行人工授精  
一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214338.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  王文琪;  徐世宏;  韩龙江
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一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法  其特征在于:1)冷冻保存:将活力高于85%的夏鲆精子与抗冻液以1:3‑1:2的体积比混合  2)解冻:将上述冻存冻精于亲鱼车间的循环水中即可解冻  混合后置于容器内再一并移入液氮罐内进行一步预冷  待冻精由固态融化为液态置于0‑4℃冰箱中保存备用。  两步冷冻  而后投入液氮中进行长期保存  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成  其特征在于:将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合  处理后投入到液氮(‑196℃)  在0℃孵育6‑8分钟  分装保存  抗冻剂为终浓度8%的(v/v)dmso(二甲基亚砜)和终浓度7%的(v/v)gly(甘油)  孵育后以分段方式降温处理  其中  稀释液为100mm蔗糖  100mm khco3  添加剂:5mm还原型谷胱甘肽  25mm nahco3  50mm牛磺酸  10%蛋黄(v/v)。  
太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  于道德;  官曙光
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孵育后以分段方式降温处理  一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法  其特征在于:将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合  混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟  处理后投入到液氮(‑196℃)  抗冻剂为终浓度10%(v/v)的丙二醇(pg)  分装保存  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成  添加剂为:终浓度5%(v/v)的蛋黄和终浓度5%bsa(v/v)。  其中稀释液为:nacl 8g/l  Na2hpo4·2h2o0.6g/l  Kh2po40.6g/l  海藻糖37.8g/l  
一种诱导雄性夏鲆与雌性牙鲆亲鱼性腺同步成熟的人工调控方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210243174.1, 申请日期: 2012-10-31, 公开日期: 2012-10-31
发明人:  肖志忠;  马道远;  李军
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一种诱导雄性夏鲆与雌性牙鲆亲鱼性腺同步成熟的人工调控方法  其特征在于:将雄性夏鲆亲鱼在秋冬季通过全光照的环境调控  抑制雄性夏鲆亲鱼性腺发育  直至翌年春季将全光照的环境转入短光照环境  此时与雌性牙鲆亲鱼同时进行性腺发育调控  实现雄性夏鲆亲鱼性腺成熟。  
一种检测荧光原位杂交质量控制的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110341817.1, 申请日期: 2012-05-02, 公开日期: 2012-05-02
发明人:  郇聘;  张晓军;  赵翠;  李富花;  相建海
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一种荧光原位杂交过程的质量控制方法  其特征在于:载玻片经多聚赖氨酸处理后  设置不同的dna样品区  将不同dna样品溶液分别加到其上  风干后经紫外交联仪照射  使dna结合到玻片上  得到简化的染色体片  而后进行免疫检测  通过不同区域信号的反应得出荧光原位杂交过程的质量反馈。