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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
Inventors:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  破碎后2~6℃离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后用含con?a?sepharose?4b亲和柱进行分离  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂mono?q预装柱纯化分离  待用  待用  分离时采用含有0.1~0.3mα?甲基?d?甘露糖苷和0.1~0.3mnacl的ph7.4  依次采用ph7.8  浓度10~30mm的tris?hcl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液和含1m?nacl的ph7.8  低温离心  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  收集上清液  流速为0.2~0.5mlmin?1  待用  收集约25~40min洗脱液  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。