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| 一种查尔霉素化合物的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110080565.1, 申请日期: 2011-10-19, 公开日期: 2011-10-19
发明人: 丁玲; 秦松; 李富超; 张伟杰; 哈特穆特·拉赤
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一种查尔霉素化合物的制备方法 其特征在于：按如下步骤操作：1)固体培养：将海洋链霉菌m491接种于m2+固体培养基 其中链霉菌m491保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心cgmcc 在28?30℃下培养直至长出青灰色的孢子 保藏编号为：cgmcc?no.2446 2)摇床培养：将上述培养的0.5?1.0cm2带有孢子丝的琼脂块接种到200?250ml豆粉液体培养基 在28?35℃温度以110?130rpm的转速下进行摇床培养4?5天后 3)萃取：将上述发酵液用有机溶剂浸提3?4次 待用 合并有机相浓缩得粗提物 4)纯化：将粗提物经硅胶柱层析 以1?3l二氯甲烷 组分4经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带 2?4l二氯甲烷/2％甲醇 再将组分4经硅胶柱层析以二氯甲烷/7％甲醇进行梯度洗脱 1?3l二氯甲烷/5％甲醇 待以展开剂为二氯甲烷/10％甲醇时rf＝0.22?0.24处 1?3l二氯甲烷/10％甲醇梯度进行洗脱 分离得到式二化合物 流速为8?11ml/min 在rf＝0.25?0.27分离得到式三化合物。 将所得组分3经浓硫酸/茴香醛显色待含棕黄色的条带 经葡聚糖层析后 在展开剂为二氯甲烷/10％甲醇时rf＝0.50?0.52分离得到式一化合物 |
| 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人: 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
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1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法 其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼 滤去水后立即加入无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 而后于?20℃或室温保存备用 加入生理盐水洗涤 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水 加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液 4)提取总dna：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液 再用滤纸吸干样品 使细胞破壁 震荡20?30秒。15000g离心30分钟 重复2?3次 而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶 吸取上清液使蛋白质去除 震荡混匀 然后在上清液中加入等体积异丙醇 于50?70℃温育 轻轻混匀 每10?20分钟颠倒混匀一次 ?20℃静置1?2小时 消化至溶液澄清 15000g离心15分钟 待用 沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。 |
| 一种检测迟缓爱德华氏菌、鲇鱼爱德华氏菌或致病性迟缓爱德华氏菌的引物序列及其检测方法和应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010620648.0, 申请日期: 2011-08-03, 公开日期: 2011-08-03
发明人: 莫照兰; 李贵阳; 肖鹏; 李杰
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seq?id?no.2：tcgttctgggtgcaatcc 一种检测迟缓爱德华氏菌的引物序列 seq?id?no.3：cctggcgttccaccactatgt 其特征在于：引物序列对seq?id?no.1和seq?id?no.2、seq?id?no.3和seq?id?no.4 Seqidno.4：gccttgatgactatgccgttc。 所述引物分别为 seq?id?no.1：ggatgaggcatcgcgtaag |
| 组织因子途径抑制物及其制备和应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010544921.6, 申请日期: 2011-05-25, 公开日期: 2011-05-25
发明人: 张敏; 孙黎
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组织因子途径抑制物tfpi?2如序列表seq?id?no.2中氨基酸序列所示。 一种组织因子途径抑制物 其特征在于：组织因子途径抑制物tfpi?1如序列表seq?id?no.1中氨基酸序列所示 |
| 一种利用角毛藻的对虾育苗方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910018387.2, 申请日期: 2011-04-20, 公开日期: 2011-04-20
发明人: 崔朝霞; 丁茂昌
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所述添加的角毛藻密度在培养池中维持在2?12万个/ml。 一种利用角毛藻的对虾育苗方法 其特征在于：将对虾幼体培育在培养池中 在幼体培育期全程的各个培育期添加幼苗所需的营养素和角毛藻 不排水 直至完成对虾从无节幼体到仔虾三期的整个培育过程 |
| 一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010261766.7, 申请日期: 2011-04-13, 公开日期: 2011-04-13
发明人: 陈英杰; 秦松; 刘少芳; 崔玉琳; 姜鹏; 陈华新; 李富超
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一种链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒的制备方法 其特征在于：1)通过pcr反应将strep?ii标签基因分别连在别藻蓝蛋白apc的α和β亚基脱辅基蛋白基因的n末端 2)将strep?ii?apca基因片段插入到带有6×his基因的载体a中6×his基因的下游 分别得到strep?ii?apca和strep?ii?apcb基因片段 同时将藻胆素生物合成酶基因hol和pcya插入到载体上 将strep?ii?apcb基因片段插入到带有6×his基因的载体b中6×his基因的下游 待用 得到pcdf?strep?ii?apca?hol?pcya 同时将色基裂合酶基因cpcs和cpcu插入到载体上 3)将步骤2)所得两个表达载体同时转化大肠杆菌 待用 得到prsf?strep?ii?apcb?cpcs?cpcu 筛选获得同时表达上述基因的工程菌 4)将上述工程菌诱导培养后分离纯化 待用 得到双标签重组apc荧光蛋白质 5)将所得双标签重组apc荧光蛋白质与锌离子修饰的超顺磁性硅壳纳米颗粒振荡混合 即得到链酶亲和素结合功能荧光磁性纳米颗粒。 |
| 一种海蜇基因组DNA的提取方法-1 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
发明人: 崔朝霞; 张姝; 栾维莎; 刘媛
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一种海蜇基因组dna提取方法 其特征在于：1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95％的酒精中脱水并保存 2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300～400ul匀浆、30～40ul质量浓度为10％的sds、3～5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶k 封口后55～56℃消化0.8～1.0小时 3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6m?nacl 待用 振荡浑匀20～30s 10000～12000rpm离心20?30分钟 吸上清 而后加入上清液的0.7～1倍体积的异丙醇 ?20～?18℃沉淀10～15分钟 沉淀后取出 以10000～12000rpm离心15?20分钟 弃去液体 并用体积浓度为70％的乙醇 离心洗1～2次 自然室温凉干 即得到海蜇碟状体的dna。 |
