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| 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24 发明人: 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立 Adobe PDF(757Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:550/2  |  提交时间:2014/08/04 1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法 其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼 滤去水后立即加入无水乙醇 2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 而后于?20℃或室温保存备用 加入生理盐水洗涤 3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水 加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液 4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液 再用滤纸吸干样品 使细胞破壁 震荡20?30秒。15000g离心30分钟 重复2?3次 而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶 吸取上清液使蛋白质去除 震荡混匀 然后在上清液中加入等体积异丙醇 于50?70℃温育 轻轻混匀 每10?20分钟颠倒混匀一次 ?20℃静置1?2小时 消化至溶液澄清 15000g离心15分钟 待用 沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。 |
| 牙鲆GH基因第1外显子区微卫星标记与幼鱼生长性状的相关分析 期刊论文 动物学杂志, 2011, 期号: 5, 页码: 108-113 作者: 倪静; 尤锋; 刘思思; 吴志昊; 徐冬冬; 文爱韵; 徐永立; 张培军 Adobe PDF(335Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:268/0  |  提交时间:2013/09/27 牙鲆幼鱼 Gh基因第1外显子 微卫星 遗传多态性 生长性状相关 |
| 牙鲆sox9基因的克隆与表达研究 期刊论文 海洋科学进展, 2011, 期号: 1, 页码: 97-104 作者: 文爱韵; 尤锋; 孙鹏; 徐冬冬; 吴志昊; 马得友; 李军; 张培军 Adobe PDF(832Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:241/0  |  提交时间:2013/09/27 牙鲆(Paralichthys Olivaceus) Sox9 基因克隆 两性差异表达 |
| 一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 专利 专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21 发明人: 吴志昊; 尤锋; 马得友; 徐冬冬; 张培军; 徐永立 Adobe PDF(454Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:310/1  |  提交时间:2014/08/04 fe ( ii ) l&Alpha 一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 ③向1-5ml空白对照溶液、已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μl用0.05-0.2mol/l乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/l菲咯嗪一钠盐溶液显色 - a 2 &Epsiv 其特征在于 ②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/l氢氧化钠溶液 fe ( iii ) l &Epsiv 具体步骤如下:①采集10-100ml水样 氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100) fe ( ii ) l&Alpha 立即加入1-2mol/l盐酸 使水样ph在4-6之间 其中 ( &Epsiv 盐酸与水样的体积比为1∶(20-100) 作为待测水样 空白对照溶液配制方法为 已知浓度的标准溶液配制方法为 fe ( ii ) l - &Epsiv 使水样ph至1-2 先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液 取ph已经调至4-6的空白对照溶液 ④在562nm波长下 fe ( iii ) l ) c fe ( iii ) = a 2 - a 1 &Alpha 作为酸化水样 再加入1-2mol/l盐酸使其ph在4-6之间 加入fecl3使其总铁浓度为0.1-1mg/l 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 ⑤取0.8-4ml测定吸光度后的空白对照溶液、标准溶液及待测水样 &Alpha 密封 测定标准溶液及待测水样的吸光度a1样 加入150-750μl用1-3mol/l盐酸配制的1-2mol/l的盐酸羟胺溶液混匀 室温静置5-10min后 ⑦重复步骤⑤ ( &Epsiv 室温下备用 A1标 再加入50-250μl用氨水配制的ph为9-10的10mol/l乙酸铵水溶液混匀 ⑥在562nm波长下 fe ( ii ) l - &Epsiv 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 测定标准溶液及待测水样的吸光度a2样 在562nm波长下 c fe ( ii ) = a 1 &Epsiv fe ( Iii ) l ) cfe(t)=cfe(Ii)+cfe(Iii)其中 A2标 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 ⑧亚铁、三价铁和总铁浓度计算 L为比色皿的光径。 测定标准溶液的吸光度a3标 通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εfe(Ii)、εfe(Iii)以及α Α=a3/a2 以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁cfe(Ii)、三价铁cfe(Iii)及总铁cfe(t)浓度 |
| 牙鲆dmrt1基因的克隆及其与P450arom基因的组织表达分析 期刊论文 海洋科学, 2010, 卷号: 34, 期号: 11, 页码: 1-6 作者: 文爱韵; 尤锋; 孙 鹏; 徐冬冬; 吴志昊; 马得友; 李 军; 张培军 Adobe PDF(1175Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:241/0  |  提交时间:2011/07/25 |
| 8种鲆鲽鱼种间遗传距离与杂交亲和性的相关性分析 期刊论文 水产学报, 2010, 卷号: 34, 期号: 2, 页码: 178-184 作者: 徐冬冬; 尤锋; 楼宝; 李军; 许建和; 吴志昊; 张培军 Adobe PDF(402Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:218/1  |  提交时间:2011/07/25 |
| 牙鲆性腺分化的组织学研究 期刊论文 海洋科学, 2009, 卷号: 33, 期号: 3, 页码: 53-58 作者: 孙鹏; 尤锋; 倪静; 张立敬; 徐冬冬; 文爱韵; 吴志昊; 徐永立; 张培军; 李军 Adobe PDF(943Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:203/1  |  提交时间:2011/07/25 |
| RAPD对圆斑星鲽和条斑星鲽养殖群体的遗传多样性研究 期刊论文 海洋科学, 2009, 卷号: 33, 期号: 8, 页码: 26-29 作者: 杨奔; 尤锋; 李军; 徐冬冬; 吴志昊; 倪静; 徐世宏; 徐永立; 张培军 Adobe PDF(3399Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:230/0  |  提交时间:2011/07/25 |
| 牙鲆(Paralichthys olivaceus)两个养殖群体GHR基因5’端Promoter区微卫星序列多态性与生长性状关系的初步研究 期刊论文 中国海洋大学学报, 2008, 卷号: 38, 期号: 5, 页码: 719-725 作者: 倪静; 尤锋; 于深辉; 张培军; 徐冬冬; 吴志昊; 文爱韵; 徐永立 Adobe PDF(323Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:193/3  |  提交时间:2011/07/25 |
| 牙鲆同质雌核发育人工诱导研究 期刊论文 高技术通讯, 2008, 卷号: 18, 期号: 8, 页码: 874-880 作者: 尤锋; 许建和; 倪静; 孙威; 朱香萍; 徐冬冬; 徐永立; 张培军 Adobe PDF(393Kb)  |  收藏  |  浏览/下载:253/0  |  提交时间:2011/07/25 |