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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310212970.3, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  马道远
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一种夏鲆冻精与牙鲆种间杂交人工授精的方法  其特征在于：将长期超低温冷冻保存的夏鲆精子经二步水浴解冻  其中  溶解后夏鲆冻精中加入其3倍体积的稀释液  稀释液为nacl  离心收集沉淀  Kh2po4和水组成。  而后与牙鲆卵子进行人工授精  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  韩龙江
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一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成  其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合  处理后投入到液氮（‑196℃）  在0℃孵育6‑8分钟  分装保存  抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油）  孵育后以分段方式降温处理  其中  稀释液为100mm蔗糖  100mm khco3  添加剂：5mm还原型谷胱甘肽  25mm nahco3  50mm牛磺酸  10%蛋黄（v/v）。  
太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214264.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  于道德;  官曙光
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孵育后以分段方式降温处理  一种太平洋鳕鱼精子高效超低温冷冻保存方法  其特征在于：将太平洋鳕鱼精液与抗冻液以1:4‑1:3的体积比例混合  混合后在0‑4℃孵育平衡8‑10分钟  处理后投入到液氮（‑196℃）  抗冻剂为终浓度10%（v/v）的丙二醇（pg）  分装保存  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂组成  添加剂为：终浓度5%（v/v）的蛋黄和终浓度5%bsa（v/v）。  其中稀释液为：nacl 8g/l  Na2hpo4·2h2o0.6g/l  Kh2po40.6g/l  海藻糖37.8g/l