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中国科学院海洋研究所机构知识库
Knowledge Management System Of Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
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实验海洋生物学重点实... [4]
作者
文献类型
专利 [2]
期刊论文 [2]
发表日期
2011 [3]
2010 [1]
语种
中文 [4]
出处
动物学杂志 [1]
海洋科学进展 [1]
资助项目
收录类别
资助机构
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语种:中文
专题:实验海洋生物学重点实验室
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WOS被引频次升序
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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人:
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
Adobe PDF(757Kb)
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浏览/下载:570/2
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提交时间:2014/08/04
1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
滤去水后立即加入无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
而后于?20℃或室温保存备用
加入生理盐水洗涤
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液
4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液
再用滤纸吸干样品
使细胞破壁
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
重复2?3次
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶
吸取上清液使蛋白质去除
震荡混匀
然后在上清液中加入等体积异丙醇
于50?70℃温育
轻轻混匀
每10?20分钟颠倒混匀一次
?20℃静置1?2小时
消化至溶液澄清
15000g离心15分钟
待用
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。
牙鲆GH基因第1外显子区微卫星标记与幼鱼生长性状的相关分析
期刊论文
动物学杂志, 2011, 期号: 5, 页码: 108-113
作者:
倪静
;
尤锋
;
刘思思
;
吴志昊
;
徐冬冬
;
文爱韵
;
徐永立
;
张培军
Adobe PDF(335Kb)
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浏览/下载:278/0
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提交时间:2013/09/27
牙鲆幼鱼
Gh基因第1外显子
微卫星
遗传多态性
生长性状相关
牙鲆sox9基因的克隆与表达研究
期刊论文
海洋科学进展, 2011, 期号: 1, 页码: 97-104
作者:
文爱韵
;
尤锋
;
孙鹏
;
徐冬冬
;
吴志昊
;
马得友
;
李军
;
张培军
Adobe PDF(832Kb)
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浏览/下载:247/0
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提交时间:2013/09/27
牙鲆(Paralichthys Olivaceus)
Sox9
基因克隆
两性差异表达
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
发明人:
吴志昊
;
尤锋
;
马得友
;
徐冬冬
;
张培军
;
徐永立
Adobe PDF(454Kb)
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浏览/下载:328/1
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提交时间:2014/08/04
fe
(
ii
)
l&Alpha
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法
③向1-5ml空白对照溶液、已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μl用0.05-0.2mol/l乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/l菲咯嗪一钠盐溶液显色
-
a
2
&Epsiv
其特征在于
②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/l氢氧化钠溶液
fe
(
iii
)
l
&Epsiv
具体步骤如下:①采集10-100ml水样
氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100)
fe
(
ii
)
l&Alpha
立即加入1-2mol/l盐酸
使水样ph在4-6之间
其中
(
&Epsiv
盐酸与水样的体积比为1∶(20-100)
作为待测水样
空白对照溶液配制方法为
已知浓度的标准溶液配制方法为
fe
(
ii
)
l
-
&Epsiv
使水样ph至1-2
先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液
取ph已经调至4-6的空白对照溶液
④在562nm波长下
fe
(
iii
)
l
)
c
fe
(
iii
)
=
a
2
-
a
1
&Alpha
作为酸化水样
再加入1-2mol/l盐酸使其ph在4-6之间
加入fecl3使其总铁浓度为0.1-1mg/l
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
⑤取0.8-4ml测定吸光度后的空白对照溶液、标准溶液及待测水样
&Alpha
密封
测定标准溶液及待测水样的吸光度a1样
加入150-750μl用1-3mol/l盐酸配制的1-2mol/l的盐酸羟胺溶液混匀
室温静置5-10min后
⑦重复步骤⑤
(
&Epsiv
室温下备用
A1标
再加入50-250μl用氨水配制的ph为9-10的10mol/l乙酸铵水溶液混匀
⑥在562nm波长下
fe
(
ii
)
l
-
&Epsiv
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
测定标准溶液及待测水样的吸光度a2样
在562nm波长下
c
fe
(
ii
)
=
a
1
&Epsiv
fe
(
Iii
)
l
)
cfe(t)=cfe(Ii)+cfe(Iii)其中
A2标
先将空白对照溶液的吸光度设置为零后
⑧亚铁、三价铁和总铁浓度计算
L为比色皿的光径。
测定标准溶液的吸光度a3标
通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εfe(Ii)、εfe(Iii)以及α
Α=a3/a2
以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁cfe(Ii)、三价铁cfe(Iii)及总铁cfe(t)浓度