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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213012.8, 申请日期: 2013-10-16, 公开日期: 2013-10-16
发明人:  刘清华;  李军;  肖志忠;  韩龙江
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一种大菱鲆精子高效超低温冷冻保存的方法  其特征在于：将大菱鲆的精液与抗冻液按体积比3:1‑4:1的比例混合  抗冻液由稀释液、抗冻剂、添加剂三部分组成其中  添加剂：蔗糖34.2g/l和终浓度10%的蛋黄（v/v）。  混合后经过两步降温处理  稀释液为nacl8g/l  抗冻剂为终浓度60%（v/v）的dmso（二甲基亚砜）或终浓度60%（v/v）  一步平衡后投入到液氮（‑196℃）  Kcl0.4g/l  的丙二醇（pg）  分装保存  Mgso4·7h2o0.1g/l  Mgcl2·6h2o0.1g/l  Na2hpo4·2h2o0.06g/l  Kh2po40.06g/l  Nahco30.35g/l  
一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310214338.2, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  王文琪;  徐世宏;  韩龙江
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一种夏鲆精子便捷式超低温冷冻方法  其特征在于：1）冷冻保存：将活力高于85%的夏鲆精子与抗冻液以1:3‑1:2的体积比混合  2）解冻：将上述冻存冻精于亲鱼车间的循环水中即可解冻  混合后置于容器内再一并移入液氮罐内进行一步预冷  待冻精由固态融化为液态置于0‑4℃冰箱中保存备用。  两步冷冻  而后投入液氮中进行长期保存  
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310213169.0, 申请日期: 2013-09-25, 公开日期: 2013-09-25
发明人:  刘清华;  李军;  徐世宏;  韩龙江
Adobe PDF(351Kb)  |  收藏  |  浏览/下载：281/0  |  提交时间：2014/08/04
一种星斑川鲽精子超低温冷冻保存方法  所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成  其特征在于：将星斑川鲽的精液与抗冻液按体积比1:3的比例混合  处理后投入到液氮（‑196℃）  在0℃孵育6‑8分钟  分装保存  抗冻剂为终浓度8%的（v/v）dmso（二甲基亚砜）和终浓度7%的（v/v）gly（甘油）  孵育后以分段方式降温处理  其中  稀释液为100mm蔗糖  100mm khco3  添加剂：5mm还原型谷胱甘肽  25mm nahco3  50mm牛磺酸  10%蛋黄（v/v）。