IOCAS-IR  > 海洋环流与波动重点实验室
海洋聚球蓝细菌(Synechococcus)的纯化鉴定及生理和生态分布特征
王晨阳
学位类型博士
2006-06-08
学位授予单位中国科学院海洋研究所
学位授予地点海洋研究所
关键词聚球蓝细菌 流式细胞仪 分离纯化 遗传系统 生态分布 胶州湾
摘要利用流式细胞仪分析了聚球蓝细菌在胶州湾的时空分布和营养盐的影响, 并对聚球蓝细菌亚群分化及其影响因子做了进一步探索。分离获得六株海洋聚球蓝细菌,分别定名为IOCAS0401、IOCAS0402、IOCAS0403、IOCAS0404、IOCAS0405、IOCAS0406。对其中两株(IOCAS0401、IOCAS0402)进行鉴定,并进一步研究了其生理生态特征。有三株菌(IOCAS0403、IOCAS0404、IOCAS0405)具有异养生长能力,选取其中两株(IOCAS0403、IOCAS0405)构建了遗传操作系统。具体内容摘要如下: 1、聚球蓝细菌在胶州湾的时空分布和营养盐的影响 胶州湾近一年的微微型浮游植物群落分析表明,聚球蓝细菌逐月的最高丰度中心有从湾外→湾口→湾内,再由湾内→湾口→湾外的变化趋势。在月变化中,聚球蓝细菌9月丰度最大,平均丰度为4.87×103 cells/ml,1-4月丰度很低,其中3月平均丰度最低为66 cells/ml。选取D5站的0 m和30 m作为表层和深层,对微微型浮游植物和营养盐的研究表明,在9、10月,N/P主要在10-30之间,聚球蓝细菌占优势51.6%(9月),98.5%(10月),其它月份大多数N/P<10或者>30,尤其以8月和11月最为显著,而这两个月也恰恰是超微真核浮游植物占优势92.1%(8月),84.8%(11月)。流式细胞仪数据表明,夏末和秋季部分站位会出现聚球蓝细菌的两个亚群,并且当N/P在33左右时可能会出现两个亚群分化,经过对N源的分析后发现,产生亚群分化时NO3-N/PO4-P在14左右。 2、 所分离到的六株聚球蓝细菌的吸收光谱表明,胶州湾的聚球蓝细菌色素种类十分丰富,基本都含有叶绿素a和藻红蛋白(PE),同时也有含藻蓝蛋白(PC)的种群。研究中发现有三株菌具有兼性异养生长能力,当有光照的时候,合成色素,自养生长进行产氧光合作用,没有光照时,色素逐渐消失,启动异养生长的代谢过程。 3、 利用流式细胞仪分析黄海近海水样中聚球蓝细菌种群组成,发现主要有不同藻红蛋白含量的两个类群组成,流式细胞仪分选后,用SN培养基培养纯化得到两个亚群优势种聚球蓝细菌IOCAS0401和IOCAS0402。荧光显微镜下镜检,两株菌在蓝色激发光(450-490 nm)下发桔红色荧光,并且IOCAS0401的荧光较IOCAS0402强。扫描电镜观察发现IOCAS0401呈椭圆形,长轴大约1.2 μm左右;IOCAS0402近似球形,直径约有0.6 μm左右。吸收光谱的检测表明,两者都有叶绿素a和藻红蛋白的特征吸收峰。其中IOCAS0401有藻尿胆素(PUB)和藻红胆素(PEB)吸收锋,而IOCAS0402只有PEB的吸收峰,两者均无藻蓝蛋白(PC)吸收锋。通过16S rDNA测序分析,结果表明两株菌都位于MC-A中的clade II类群,与从日本海域分离获得的MBIC10224菌株有较高的亲缘关系,虽然这三株菌都归为clade II,但单独成一分支,表明它们带有明显的西太平洋特色。 4、 选取其中两株IOCAS0403和IOCAS0405构建遗传系统,抗生素图谱表明,IOCAS0403对四环素有抗性,自然转化结果显示,IOCAS0403不能自然转化,IOCAS0405具有自然转化能力,同时两者都不能进行接合转移。
页数68
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/873
专题海洋环流与波动重点实验室
推荐引用方式
GB/T 7714
王晨阳. 海洋聚球蓝细菌(Synechococcus)的纯化鉴定及生理和生态分布特征[D]. 海洋研究所. 中国科学院海洋研究所,2006.
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