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一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310309620.9, 申请日期: 2013-11-27, 公开日期: 2013-11-27
发明人:  李鹏程;  李婷;  邢荣娥;  刘松;  于华华
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一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法  其特征在于:a)以扇贝为原料  b)将上述收集的上清液加入活性炭进行脱色处理  烘干后用高速粉碎机粉碎  过滤收集清液  c)调节上述收集清液的ph值  粉碎后粉末于蒸馏水中55℃‑80℃  待用  而后去除清液中酸性沉淀蛋白质和碱性沉淀蛋白质  d)将上述清液减压浓缩  恒温水浴保温1‑3h  过滤收集清液  所得浓缩液经纯化处理即为天然牛磺酸。  过滤收集清液  待用  待用  
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  李冰;  孟祥涛;  崔金会
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  收集采用含0.2m?nacl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  所述洗脱液为含不同浓度nacl的磷酸缓冲液  滤液经含deae?sepharose?fast?flow阴离子交换柱  Nacl浓度分别为0、0.1、0.2、0.3和2m  采用洗脱液以1?3mlmin?1流速进行纯化分离  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  收集洗脱液在低温下用3~5k的超滤管进行浓缩  滤液经凝胶色谱柱superdex200采用0.15m?nacl  待用  10~50mm  ph7.0pbs缓冲液以0.2~1.0mlmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱体积处于60~80ml的洗脱液  而后在2~6℃下用3~5k的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  破碎后2~6℃离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后用含con?a?sepharose?4b亲和柱进行分离  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂mono?q预装柱纯化分离  待用  待用  分离时采用含有0.1~0.3mα?甲基?d?甘露糖苷和0.1~0.3mnacl的ph7.4  依次采用ph7.8  浓度10~30mm的tris?hcl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液和含1m?nacl的ph7.8  低温离心  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  收集上清液  流速为0.2~0.5mlmin?1  待用  收集约25~40min洗脱液  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对ph7.820mm?tris?hcl缓冲液透析过夜  破碎后低温离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后将其上含deae?sepharosefast?flow的阴离子交换树柱进行分离  4)将步骤3)用截留分子量为3kda的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂superdex75柱纯化分离  待用  待用  首先采用ph7.820mmtris?hcl缓冲液洗脱  采用含有浓度为0.15?0.5m的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液洗脱  而后采用含有浓度分别为0.1?2m不同浓度的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  流速为0.2?0.5mlmin?1  收集各洗脱峰  收集各洗脱峰  而后用截留分子量为3kda的超滤管浓缩  其中流出体积50ml?80ml内的组分即为热激蛋白60。  待用