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一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05
发明人:  李鹏程;  李克成;  邢荣娥;  刘松;  于华华;  秦玉坤
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一种不同乙酰度的n?乙酰化壳六糖的分离纯化方法  其特征在于:将全脱乙酰化壳六糖进行乙酰化后得到n?乙酰化壳六糖混合物  所得n?乙酰化壳六糖混合物溶解后用离子交换色谱柱以含0?2m浓度的nacl的缓冲溶液  在ph3?6  2?5mlmin?1流速下进行分离纯化  以糖含量收集含有寡糖的不同组分的洗脱液  将不同组分的洗脱液分别经活性碳萃取脱盐后浓缩  即得到n?乙酰化壳六糖、n  n’?二乙酰化壳六糖、n  N’  n”?三乙酰化壳六糖、n  N’  N”  n”’?四乙酰化壳六糖、n  N’  N”  N”’  n””?五乙酰化壳六糖、n  N’  N”  N”’  N””  n””’?六乙酰化壳六糖。  
一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310309620.9, 申请日期: 2013-11-27, 公开日期: 2013-11-27
发明人:  李鹏程;  李婷;  邢荣娥;  刘松;  于华华
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一种从扇贝内脏中提取天然牛磺酸的方法  其特征在于:a)以扇贝为原料  b)将上述收集的上清液加入活性炭进行脱色处理  烘干后用高速粉碎机粉碎  过滤收集清液  c)调节上述收集清液的ph值  粉碎后粉末于蒸馏水中55℃‑80℃  待用  而后去除清液中酸性沉淀蛋白质和碱性沉淀蛋白质  d)将上述清液减压浓缩  恒温水浴保温1‑3h  过滤收集清液  所得浓缩液经纯化处理即为天然牛磺酸。  过滤收集清液  待用  待用  
一种鲐鱼活性肽的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310002099.4, 申请日期: 2013-05-08, 公开日期: 2013-05-08
发明人:  李鹏程;  王雪芹;  邢荣娥;  刘松;  于华华;  李克成;  李冰;  秦玉坤;  李荣锋
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一种鲐鱼活性肽的制备方法  其中每克经绞碎的原材料鲐鱼中加入1000u~2000u酶活力单位的蛋白酶。  其特征在于:以鲐鱼作为原材料经绞碎  调节ph值后加入蛋白酶进行酶解反应5h~8h  加入去离子水置于恒温水浴中经搅拌保温5~10min  反应完毕后  再调节ph值  酶灭活  离心  收集上清液  冷冻干燥  即得鲐鱼活性肽  
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  李冰;  孟祥涛;  崔金会
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  收集采用含0.2m?nacl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  所述洗脱液为含不同浓度nacl的磷酸缓冲液  滤液经含deae?sepharose?fast?flow阴离子交换柱  Nacl浓度分别为0、0.1、0.2、0.3和2m  采用洗脱液以1?3mlmin?1流速进行纯化分离  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  收集洗脱液在低温下用3~5k的超滤管进行浓缩  滤液经凝胶色谱柱superdex200采用0.15m?nacl  待用  10~50mm  ph7.0pbs缓冲液以0.2~1.0mlmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱体积处于60~80ml的洗脱液  而后在2~6℃下用3~5k的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种Iota-卡拉胶的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010243274.5, 申请日期: 2012-02-08, 公开日期: 2012-02-08
发明人:  刘松;  李鹏程;  邢荣娥;  李荣锋;  李克成;  冯金华;  于华华
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一种iota?卡拉胶的制备方法  其特征在于:以刺生麒麟菜(eucheuma?spinosum)为原料  将原料于质量百分比为3?7%氢氧化钾中进行碱改性  改性处理后的原料经稀酸溶液中和至ph为7?8  中和后用水清洗改性后原料液  而后于微波辐射功率为180?450w下微波辐射处理5?20min  高温水煮提胶  提胶时加入0.01?0.1%的焦磷酸钾助剂  即得到iota?卡拉胶。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  破碎后2~6℃离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后用含con?a?sepharose?4b亲和柱进行分离  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂mono?q预装柱纯化分离  待用  待用  分离时采用含有0.1~0.3mα?甲基?d?甘露糖苷和0.1~0.3mnacl的ph7.4  依次采用ph7.8  浓度10~30mm的tris?hcl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液和含1m?nacl的ph7.8  低温离心  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  收集上清液  流速为0.2~0.5mlmin?1  待用  收集约25~40min洗脱液  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对ph7.820mm?tris?hcl缓冲液透析过夜  破碎后低温离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后将其上含deae?sepharosefast?flow的阴离子交换树柱进行分离  4)将步骤3)用截留分子量为3kda的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂superdex75柱纯化分离  待用  待用  首先采用ph7.820mmtris?hcl缓冲液洗脱  采用含有浓度为0.15?0.5m的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液洗脱  而后采用含有浓度分别为0.1?2m不同浓度的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  流速为0.2?0.5mlmin?1  收集各洗脱峰  收集各洗脱峰  而后用截留分子量为3kda的超滤管浓缩  其中流出体积50ml?80ml内的组分即为热激蛋白60。  待用  
一种壳聚糖季铵盐及其制备方法与应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047518.6, 申请日期: 2008-02-27, 公开日期: 2008-02-27
发明人:  邢荣娥;  李鹏程;  刘松
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聚合度n=75-500时为白色粉末状分子量在30~160kd的壳聚糖季铵盐  1.一种壳聚糖季铵盐  其特征在于:包括甲壳低聚糖季铵盐和/或壳聚糖季铵盐  其结构式为:其中:聚合度n=5-30时为淡黄色粉末状分子量在2~8kd的甲壳低聚糖季铵盐  其制备步骤如下:1)称取原料壳聚糖或壳低聚糖粉末  其中:蒸馏水的加入量为原料壳聚糖重量体积的10~15倍  备用  2)向步骤1)中加入蒸馏水  搅拌温度升温至60~80℃  3)向步骤2)中加入异丙醇和缩水甘油三甲基氯化铵  反应3-7小时  其中:异丙醇与原料壳聚糖的体积重量比为3~5∶1  缩水甘油三甲基氯化铵与壳聚糖的摩尔比为3~5∶1  4)用hcl调节步骤3)反应液的ph值为5.5  备用  5)步骤4)中的反应液用蒸馏水  通过截留分子量为8000的透析袋透析  6)向浓缩液加入丙酮  透析后浓缩  析出黄色或白色沉淀物  7)将步骤6)中沉化的沉积物抽滤  同时还具有强吸湿保湿性能。  室温沉化30-60分钟  滤饼在50-70℃下真空烘干  其特性为:甲壳低聚糖季铵盐和/或壳聚糖季铵盐具有抗氧化活性  即为:甲壳低聚糖季铵盐和/或壳聚糖季铵盐  主要表现在清除超氧阴离子自由基、清除羟自由基、还原能力和螯合能力