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| 文昌鱼胚胎仔稚幼鱼循环水人工控制孵育系统 专利
专利类型: 实用新型, 专利号: CN201220662997.3, 申请日期: 2013-05-22, 公开日期: 2013-05-22
发明人: 谭训刚 ; 孙威; 徐永立; 张培军; 尤锋
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一种文昌鱼胚胎仔稚幼鱼循环水人工控制孵育系统 其特征在于：包括框架结构(4)、孵育容器(3)、恒温控制系统 其中框架结构(4)上设有多个孵育容器(3) 各孵育容器(3)均与恒温控制系统连接 通过恒温控制系统使孵育容器(3)内的胚胎仔或稚幼鱼生存在恒温环境中。 |
| 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人: 尤锋; 吴志昊; 王伟; 徐冬冬; 张毅; 张培军; 徐永立
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1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇 一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法 其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼 滤去水后立即加入无水乙醇 2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品 而后于?20℃或室温保存备用 加入生理盐水洗涤 3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼 鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇 1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水 加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液 4)提取总dna：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液 再用滤纸吸干样品 使细胞破壁 震荡20?30秒。15000g离心30分钟 重复2?3次 而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶 吸取上清液使蛋白质去除 震荡混匀 然后在上清液中加入等体积异丙醇 于50?70℃温育 轻轻混匀 每10?20分钟颠倒混匀一次 ?20℃静置1?2小时 消化至溶液澄清 15000g离心15分钟 待用 沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。 |
| 一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
发明人: 吴志昊; 尤锋; 马得友; 徐冬冬; 张培军; 徐永立
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fe ( ii ) l&Alpha 一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 ③向1-5ml空白对照溶液、已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μl用0.05-0.2mol/l乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/l菲咯嗪一钠盐溶液显色 - a 2 &Epsiv 其特征在于 ②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/l氢氧化钠溶液 fe ( iii ) l &Epsiv 具体步骤如下：①采集10-100ml水样 氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100) fe ( ii ) l&Alpha 立即加入1-2mol/l盐酸 使水样ph在4-6之间 其中 ( &Epsiv 盐酸与水样的体积比为1∶(20-100) 作为待测水样 空白对照溶液配制方法为 已知浓度的标准溶液配制方法为 fe ( ii ) l - &Epsiv 使水样ph至1-2 先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液 取ph已经调至4-6的空白对照溶液 ④在562nm波长下 fe ( iii ) l ) c fe ( iii ) = a 2 - a 1 &Alpha 作为酸化水样 再加入1-2mol/l盐酸使其ph在4-6之间 加入fecl3使其总铁浓度为0.1-1mg/l 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 ⑤取0.8-4ml测定吸光度后的空白对照溶液、标准溶液及待测水样 &Alpha 密封 测定标准溶液及待测水样的吸光度a1样 加入150-750μl用1-3mol/l盐酸配制的1-2mol/l的盐酸羟胺溶液混匀 室温静置5-10min后 ⑦重复步骤⑤ ( &Epsiv 室温下备用 A1标 再加入50-250μl用氨水配制的ph为9-10的10mol/l乙酸铵水溶液混匀 ⑥在562nm波长下 fe ( ii ) l - &Epsiv 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 测定标准溶液及待测水样的吸光度a2样 在562nm波长下 c fe ( ii ) = a 1 &Epsiv fe ( Iii ) l ) cfe(t)＝cfe(Ii)+cfe(Iii)其中 A2标 先将空白对照溶液的吸光度设置为零后 ⑧亚铁、三价铁和总铁浓度计算 L为比色皿的光径。 测定标准溶液的吸光度a3标 通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εfe(Ii)、εfe(Iii)以及α Α＝a3/a2 以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁cfe(Ii)、三价铁cfe(Iii)及总铁cfe(t)浓度 |
| 一种牙鲆仔稚幼鱼性激素水平测定的样品制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200710015287.5, 申请日期: 2010-06-23, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 孙鹏; 尤锋; 杨奔; 张培军; 徐永立
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| 一种鳗弧菌油乳化二价口服疫苗及其制备 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610134444.X, 申请日期: 2008-06-04, 公开日期: 2008-06-04
发明人: 莫照兰; 肖鹏; 邹玉霞; 王波; 徐永立; 张培军
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1.一种鳗弧菌油乳化二价口服疫苗 其特征在于：疫苗由油相和水相组成 水相中加入利斯顿氏菌属listonella Macdonellet Collwell的鳗利斯顿氏菌vibrio Anguillarum O1血清型两种亚型菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(Cgmcc no.1870和Cgmcc No.1871)的菌悬液。 |
| 一种牙鲆受精卵第一次卵裂抑制的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200410050312.X, 申请日期: 2008-04-23, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 尤锋; 张培军; 王新成; 许建和
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| 一种鳗弧菌空壳疫苗及其制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200610047229.6, 申请日期: 2008-01-23, 公开日期: 2008-01-23
发明人: 莫照兰; 茅云翔; 邹玉霞; 肖鹏; 王波; 叶旭红; 李杰; 徐永立; 张培军
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1.一种鳗弧菌空壳疫苗 其特征在于：以鳗弧菌为工程菌 其含有能表达噬菌体phix174裂解基因e及其表达调控系统的载体。 |
| 一种海水鲆鲽鱼类受精卵的组织切片方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200410050434.9, 申请日期: 2007-12-05, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 孙威; 尤锋; 张培军; 徐永立
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| 微藻培养的光生物反应器装置 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200410020946.0, 申请日期: 2007-09-19, 公开日期: 2011-07-15
发明人: 刘建国; 刘伟; 王增福; 史朋家; 李颍玉; 张晓丽; 林伟
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| 一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510136709.5, 申请日期: 2007-07-04, 公开日期: 2007-07-04
发明人: 许建和; 尤锋; 张培军; 吴雄飞; 徐永立; 蒋宏雷
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权利要求书1、一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法 包括：精液保存、精液稀释、精子遗传物质失活 ②精液稀释：采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液 其特征在于：①精液保存：将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2～4℃低温条件下备用 稀释倍数为20～100倍 其中：按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为nacl 0.60～0.80％ 稀释液预冷到0～5℃ 然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0～5℃的培养皿中 Kcl 0.03～0.05％ Ph 其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1～0.3cm Cacl2 7.0～7.3 其中：紫外光源的照射剂量为1800～6000erg/mm2。 0.01～0.03％ ③精子遗传物质失活：紫外光源预热5～10min后 葡萄糖0.05～0.10％ 将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下 照射1.5～5min 使得大黄鱼遗传物质失活 |
