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一种嗜盐曲霉菌F1及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110356217.2, 申请日期: 2012-07-11, 公开日期: 2012-07-11
发明人:  林秀坤;  肖琳;  吴宁;  刘明;  刘海洲;  魏鉴腾;  赵进;  王惠;  王凤霞;  郭颖
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一种嗜盐曲霉菌f1  其特征在于:嗜盐曲霉菌f1(aspergillus?sp.f1)  保藏于中国典型培养物保藏中心(中国武汉大学内)  保藏号为:cctcc?no:m?2011277  保藏日期为:2011年8月4日。  
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人:  尤锋;  吴志昊;  王伟;  徐冬冬;  张毅;  张培军;  徐永立
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1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇  一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法  其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼  滤去水后立即加入无水乙醇  2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  而后于?20℃或室温保存备用  加入生理盐水洗涤  3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液  4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液  再用滤纸吸干样品  使细胞破壁  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  重复2?3次  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶  吸取上清液使蛋白质去除  震荡混匀  然后在上清液中加入等体积异丙醇  于50?70℃温育  轻轻混匀  每10?20分钟颠倒混匀一次  ?20℃静置1?2小时  消化至溶液澄清  15000g离心15分钟  待用  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。  
一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010110284.1, 申请日期: 2010-07-21, 公开日期: 2010-07-21
发明人:  吴志昊;  尤锋;  马得友;  徐冬冬;  张培军;  徐永立
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fe ( ii ) l&Alpha  一种海水中亚铁、三价铁及总铁含量的测定方法  ③向1-5ml空白对照溶液、已知浓度的标准溶液及待测水样中分别加入100-500μl用0.05-0.2mol/l乙酸铵水溶液配制的0.01-0.05mol/l菲咯嗪一钠盐溶液显色   - a 2 &Epsiv  其特征在于  ②向步骤①所得经酸化的水样中加入1-2mol/l氢氧化钠溶液   fe ( iii ) l &Epsiv  具体步骤如下:①采集10-100ml水样  氢氧化钠溶液与水样的体积比为1∶(20-100)   fe ( ii ) l&Alpha  立即加入1-2mol/l盐酸  使水样ph在4-6之间  其中   ( &Epsiv  盐酸与水样的体积比为1∶(20-100)  作为待测水样  空白对照溶液配制方法为  已知浓度的标准溶液配制方法为   fe ( ii ) l - &Epsiv  使水样ph至1-2  先配制与待测水样初始盐度一致的氯化钠水溶液  取ph已经调至4-6的空白对照溶液  ④在562nm波长下   fe ( iii ) l ) c fe ( iii ) = a 2 - a 1 &Alpha  作为酸化水样  再加入1-2mol/l盐酸使其ph在4-6之间  加入fecl3使其总铁浓度为0.1-1mg/l  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  ⑤取0.8-4ml测定吸光度后的空白对照溶液、标准溶液及待测水样   &Alpha  密封  测定标准溶液及待测水样的吸光度a1样  加入150-750μl用1-3mol/l盐酸配制的1-2mol/l的盐酸羟胺溶液混匀  室温静置5-10min后  ⑦重复步骤⑤   ( &Epsiv  室温下备用  A1标  再加入50-250μl用氨水配制的ph为9-10的10mol/l乙酸铵水溶液混匀  ⑥在562nm波长下   fe ( ii ) l - &Epsiv  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  测定标准溶液及待测水样的吸光度a2样  在562nm波长下   c fe ( ii ) = a 1 &Epsiv   fe ( Iii ) l ) cfe(t)=cfe(Ii)+cfe(Iii)其中  A2标  先将空白对照溶液的吸光度设置为零后  ⑧亚铁、三价铁和总铁浓度计算  L为比色皿的光径。  测定标准溶液的吸光度a3标  通过标准溶液的总铁浓度及其测定的3次吸光度先根据下述公式计算出亚铁和三价铁的吸光系数εfe(Ii)、εfe(Iii)以及α  Α=a3/a2  以此再结合水样测定的2次吸光度利用下述公式计算出海水水样中亚铁cfe(Ii)、三价铁cfe(Iii)及总铁cfe(t)浓度  
一种三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810160014.4, 申请日期: 2010-06-16, 公开日期: 2010-06-16
发明人:  崔朝霞;  谭烽;  王春琳;  吴丹华;  栾维莎
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一种三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法  其特征在于:利用选育材料的基因组微卫星作为分子标记  根据分子标记得到遗传结构中存在生殖隔离明显的群体作为杂交群体  杂交群体进行杂交组合  即得三疣梭子蟹快速生长品系。  
一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510136709.5, 申请日期: 2007-07-04, 公开日期: 2007-07-04
发明人:  许建和;  尤锋;  张培军;  吴雄飞;  徐永立;  蒋宏雷
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权利要求书1、一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法  包括:精液保存、精液稀释、精子遗传物质失活  ②精液稀释:采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液  其特征在于:①精液保存:将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2~4℃低温条件下备用  稀释倍数为20~100倍  其中:按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为nacl 0.60~0.80%  稀释液预冷到0~5℃  然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0~5℃的培养皿中  Kcl 0.03~0.05%  Ph  其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1~0.3cm  Cacl2  7.0~7.3  其中:紫外光源的照射剂量为1800~6000erg/mm2。  0.01~0.03%  ③精子遗传物质失活:紫外光源预热5~10min后  葡萄糖0.05~0.10%  将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下  照射1.5~5min  使得大黄鱼遗传物质失活