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一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人:  尤锋;  吴志昊;  王伟;  徐冬冬;  张毅;  张培军;  徐永立
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1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇  一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法  其特征在于：1)样品固定：采集鱼卵或仔鱼  滤去水后立即加入无水乙醇  2)样品中固定液的去除：取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品  而后于?20℃或室温保存备用  加入生理盐水洗涤  3)样品消化：取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼  鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为：1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇  1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水  加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液  4)提取总dna：将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液  再用滤纸吸干样品  使细胞破壁  震荡20?30秒。15000g离心30分钟  重复2?3次  而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶  吸取上清液使蛋白质去除  震荡混匀  然后在上清液中加入等体积异丙醇  于50?70℃温育  轻轻混匀  每10?20分钟颠倒混匀一次  ?20℃静置1?2小时  消化至溶液澄清  15000g离心15分钟  待用  沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。  
对照组和雌核发育牙鲆血清中睾酮与雌二醇水平的比较 期刊论文
海洋科学, 2011, 期号: 12, 页码: 41561
作者:  孙鹏;  尤锋;  李军;  宋宗城;  张培军
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牙鲆(Paralichthys Olivaceus)  雌核发育  卵巢  t  E2  
牙鲆GH基因第1外显子区微卫星标记与幼鱼生长性状的相关分析 期刊论文
动物学杂志, 2011, 期号: 5, 页码: 108-113
作者:  倪静;  尤锋;  刘思思;  吴志昊;  徐冬冬;  文爱韵;  徐永立;  张培军
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牙鲆幼鱼  Gh基因第1外显子  微卫星  遗传多态性  生长性状相关  
低氧和高氧对大菱鲆幼鱼红细胞核异常及氧化抗氧化平衡的影响 期刊论文
上海海洋大学学报, 2011, 期号: 6, 页码: 808-813
作者:  吴志昊;  尤锋;  王英芳;  文爱韵;  马得友;  徐永立;  张培军
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大菱鲆幼鱼  溶解氧  核异常  超氧化物歧化酶  过氧化氢酶  丙二醛  
牙鲆sox9基因的克隆与表达研究 期刊论文
海洋科学进展, 2011, 期号: 1, 页码: 97-104
作者:  文爱韵;  尤锋;  孙鹏;  徐冬冬;  吴志昊;  马得友;  李军;  张培军
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牙鲆(Paralichthys Olivaceus)  Sox9  基因克隆  两性差异表达  
水中亚铁对大菱鲆幼鱼红细胞核异常及碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影响 期刊论文
海洋湖沼通报, 2011, 卷号: 000, 期号: 4, 页码: 45-51
作者:  吴志昊;  尤锋;  王英芳;  文爱韵;  马得友;  徐永立;  张培军
Adobe PDF(390Kb)  |  收藏  |  浏览/下载：266/0  |  提交时间：2013/09/27
大菱鲆(Scophthalmus Maximus)幼鱼  亚铁fe(Ii)  核异常  碱性磷酸酶  超氧化物歧化酶