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一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310140315.1, 申请日期: 2013-08-07, 公开日期: 2013-08-07
发明人:  李鹏程;  薛伟;  于华华;  李荣锋;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  陈晓琳;  胡林峰
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一种从水母触手中分离高纯度未释放刺丝囊的方法  其特征在于:将冷冻溶解后水母触手离心  收集上清液  上清液经离心后  收集沉淀  将沉淀用海水溶解后  过滤收集滤液  离心后收集的沉淀为高纯度未释放的水母刺丝囊。  
一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  李冰;  孟祥涛;  崔金会
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  收集采用含0.2m?nacl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  所述洗脱液为含不同浓度nacl的磷酸缓冲液  滤液经含deae?sepharose?fast?flow阴离子交换柱  Nacl浓度分别为0、0.1、0.2、0.3和2m  采用洗脱液以1?3mlmin?1流速进行纯化分离  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  收集洗脱液在低温下用3~5k的超滤管进行浓缩  滤液经凝胶色谱柱superdex200采用0.15m?nacl  待用  10~50mm  ph7.0pbs缓冲液以0.2~1.0mlmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱体积处于60~80ml的洗脱液  而后在2~6℃下用3~5k的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
沙蜇(Stomolophus meleagris)刺丝囊毒素生物活性的初步分析 期刊论文
中国生物工程杂志, 2012, 期号: 6, 页码: 43-47
作者:  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  李鹏程
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沙蜇stomolophus Meleagris  刺丝囊毒素  溶血活性  致死活性  Sod活性  抗肿瘤活性  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  破碎后2~6℃离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后用含con?a?sepharose?4b亲和柱进行分离  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂mono?q预装柱纯化分离  待用  待用  分离时采用含有0.1~0.3mα?甲基?d?甘露糖苷和0.1~0.3mnacl的ph7.4  依次采用ph7.8  浓度10~30mm的tris?hcl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液和含1m?nacl的ph7.8  低温离心  浓度为10~30mm的tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  收集上清液  流速为0.2~0.5mlmin?1  待用  收集约25~40min洗脱液  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对ph7.820mm?tris?hcl缓冲液透析过夜  破碎后低温离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后将其上含deae?sepharosefast?flow的阴离子交换树柱进行分离  4)将步骤3)用截留分子量为3kda的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂superdex75柱纯化分离  待用  待用  首先采用ph7.820mmtris?hcl缓冲液洗脱  采用含有浓度为0.15?0.5m的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液洗脱  而后采用含有浓度分别为0.1?2m不同浓度的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  流速为0.2?0.5mlmin?1  收集各洗脱峰  收集各洗脱峰  而后用截留分子量为3kda的超滤管浓缩  其中流出体积50ml?80ml内的组分即为热激蛋白60。  待用  
一种保护霞水母毒素生物活性的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010508895.1, 申请日期: 2011-04-06, 公开日期: 2011-04-06
发明人:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种保护霞水母毒素生物活性的方法  其特征在于:在霞水母毒素内添加金属酶抑制剂或酸性蛋白酶抑制剂  进而有效保护霞水母毒素生物活性。  
组织研磨器细胞破碎法提取霞水母(Cyanea sp.)毒素的初步研究 期刊论文
海洋与湖沼, 2011, 期号: 6, 页码: 794-797
作者:  李荣锋;  于华华;  冯金华;  李鹏程
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组织研磨器  霞水母  刺丝囊细胞  毒素提取  
霞水母刺丝囊细胞热激蛋白60(Hsp60)的分离纯化与鉴定 期刊论文
中国生物工程杂志, 2011, 期号: 10, 页码: 35-38
作者:  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  李鹏程
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霞水母  Cyanea Nozakii Kishinouye  热激蛋白60 Hsp60  纯化  
从水母中分离的具有抗氧化活性的蛋白及其应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200710100726.2, 申请日期: 2010-03-24, 公开日期: 2011-07-15
发明人:  李鹏程;  于华华;  刘希光;  邢荣娥;  刘松;  郭占勇;  王丕波;  李翠萍
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霞水母Cyanea sp刺丝囊毒素溶血活性的稳定性研究 期刊论文
海洋科学, 2009, 卷号: 33, 期号: 9, 页码: 49-56
作者:  冯金华;  于华华;  李荣锋;  邢荣娥;  刘松;  李鹏程
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