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文蛤微卫星标记的检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112746.2, 申请日期: 2013-01-02, 公开日期: 2013-01-02
发明人:  刘保忠;  卢霞;  王鸿霞
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文蛤微卫星标记的检测方法  其特征在于:首先利用文蛤est序列获取微卫星标记的微卫星核心序列  所述特异性引物为正链:5’?tcccaggaacgattgttagg?3’  并在其序列两端设计特异性引物并进行pcr扩增  负链:5’?agcattcacgacaccaacat?3’。  对pcr产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测  从而检测文蛤个体的基因型  及在此微卫星位点的遗传变异  获得文蛤该位点的遗传多态性图谱  
一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
发明人:  卢霞;  王鸿霞;  刘保忠
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一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法  gc含量为40%?60%  包括微卫星位点来源、引物设计、引物优化和微卫星标记家系鉴定体系  2)引物设计:在微卫星重复的侧翼序列利用软件primer?premier?5.0设计引物  退火温度为45?65℃  其特征在于:1)微卫星位点的来源:提取文蛤的基因组dna利用提取的dna  引物设计条件为:引物长度为19?25mer  预期pcr产物长度为100?400bp  采用限制性内切酶法获得文蛤基因组dna片段  并构建微卫星磁珠富集文库  检测阳性克隆  3)引物优化:根据不同引物的tm值进行温度梯度优化  经测序得到含有微卫星重复的dna序列  在tm值上下各10℃  4)微卫星标记家系鉴定体系的确立:微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)衡量  温度梯度优化扩增得到的pcr产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?eb染色系统进行检测  根据上述优化获得的ta值  选取杂带较少、特异性产物亮度较高的pcr反应对应的温度为该引物的最佳退火温度ta  选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)进而衡量多态性信息  根据pic值  Pic小于0.25的标记  筛选得到重复性好、稳定性好  Pic值大于0.25的位点  作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系  用于文蛤的家系区分与个体识别。  
文蛤铁蛋白基因及编码蛋白和其体外重组表达产物的应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910229804.8, 申请日期: 2011-05-11, 公开日期: 2011-05-11
发明人:  刘保忠;  王晓梅;  姚学良;  张继泉;  相建海
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文蛤铁蛋白基因  其特征在于:具有序列表seq?id?no:1中碱基序列。  
文蛤组织蛋白酶B基因及编码蛋白和应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910229805.2, 申请日期: 2011-05-11, 公开日期: 2011-05-11
发明人:  刘保忠;  姚学良;  王晓梅;  相建海
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文蛤组织蛋白酶b基因  其特征在于:具有序列表sediq?no.1中的碱基序列。  
文蛤(Meretrix meretrix)铁蛋白的重组表达及其组织表达特征分析 期刊论文
海洋与湖沼, 2011, 期号: 6, 页码: 863-867
作者:  姚学良;  孙金生;  张勤;  刘保忠
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文蛤  铁蛋白  重组表达  组织分布  
文蛤溶菌酶基因及其编码蛋白和应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010201257.5, 申请日期: 2010-12-22, 公开日期: 2010-12-22
发明人:  刘保忠;  岳欣;  郇聘;  王鸿霞
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一种文蛤溶菌酶基因  其特征在于:文蛤溶菌酶基因的cdna序列为序列表seq??id??no??1中所示的核苷酸序列。  
文蛤(Meretrix meretrix)幼虫发育过程中细胞凋亡和Caspase 功能分析2009, 期刊论文
海洋与湖沼, 2009, 卷号: 40, 期号: 2, 页码: 181-186
作者:  王晓梅;  刘保忠;  相建海
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环境因子对硬壳蛤Mercenaria mercenaria稚贝成活率和生长率的影响 期刊论文
海洋与湖沼, 2003, 卷号: 34, 期号: 2, 页码: 142-149
作者:  张涛;  杨红生;  刘保忠
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