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| 进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系及应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310340730.1, 申请日期: 2013-12-25, 公开日期: 2013-12-25
发明人: 于洋 ; 李富花; 张晓军; 相建海
 Adobe PDF(6162Kb) |  收藏 | 浏览/下载：318/2 | 提交时间：2014/08/04
进行凡纳滨对虾家系鉴定的多重微卫星鉴定体系 包括多重微卫星引物体系 其特征在于：使用多态性高的lvm1‑lvm15共15对微卫星引物构成两个多重微卫星引物体系 所述的两个多重微卫星引物体系如下：1）多重微卫星引物体系1的引物序列和荧光标记组合为：lvm1f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑gatgacctgcctttctctgc‑3’lvm1r:5’‑gggagagatgatgggaagaag‑3’lvm2f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑atggcacaaataggatcttg‑3’lvm2r:5’‑gactggaagagcactgattc‑3’lvm3f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑atacgaaacaccccatccc‑3’lvm3r:5’‑gtggtcttacctcgtggctc‑3’lvm4f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑agcacctagcacttgctgaac‑3’lvm4r:5’‑agagactcacatcctcatcctc‑3’lvm5f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cattgaaaacggaatcctcg‑3’lvm5r:5’‑gatattcccatcaacacagcg‑3’lvm6f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑caccaaaacgaacgaaacg‑3’lvm6r:5’‑ggataaaaacgaattgtataccg‑3’lvm7f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑gagagcaaataagaaagggc‑3’lvm7r:5’‑aggatgcaaatgataacgag‑3’lvm8f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑ggcacactgtttagtcctcg‑3’lvm8r:5’‑cgaacagaatggcagaggag‑3’lvm9f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑cccgacttggcttttagttg‑3’lvm9r:5’‑gagattgctatcctcggctg‑3’lvm10f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcctgcgagtcactttatctc‑3’lvm10r:5’‑tttattgcgtatcccagaagc‑3’2）多重微卫星引物体系2的引物和荧光标记组合如下：lvm11f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑ccgccatcatcatcaaca‑3’lvm11r:5’‑tcattcgggttcgagactc‑3’lvm12f:Rox（羧基x罗丹明）‑5’‑gatcattcgcccctcttttt‑3’lvm12r:5’‑atctacggttcgagagcaga‑3’lvm13f:Hex(六氯荧光素)‑5’‑ggactcacacttctggttc‑3’lvm13r:5’‑ggctgcaccttgtaagtc‑3’lvm14f:Tamra(羧基四甲基罗丹明)‑5’‑tatgctcgttccctttgctt‑3’lvm14r:5’‑ttgaaggaaaagtgttgggg‑3’lvm15f:6‑fam（羧基荧光素）‑5’‑actagtggatctgtctattcat‑3’lvm15r:5’‑atacccacccatgcatgtta‑3’。 |
| 一种累代选育对虾新品种的鉴定方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210384634.2, 申请日期: 2013-01-23, 公开日期: 2013-01-23
发明人: 相建海; 于洋; 张晓军; 李富花
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一种对累代选育对虾新品种的鉴定方法 其特征在于：采用线粒体控制区的引物扩增并测序待鉴定群体的线粒体控制区 将扩增所得线粒体控制区序列符合累代选育群体单倍型的待鉴定群体再利用5对微卫星位点引物进行扩增 所述5对微卫星位点引物为：引物名序列引物名序列khv1f5’?ttaccgcctaagagcgaatg?3’khv1r5’?tgtcctttcgtaccagtcaag?3’khv2f5’?gatgtacacaactgtacttcg?3’khv2r5’?gagatgataagagaacgaaag?3’khv3f5’?gagagcaaataagaaagggc?3’khv3r5’?aggatgcaaatgataacgag?3’khv4f5’?cgaagagatttatccaggg?3’khv4r5’?cgtgcattattatcctttcc?3’khv5f5’?atgctgcatcatctctgac?3’khv5r5’?aggaaaagacggtgaaatag?3’ 将扩增所的产物进行微卫星分型 而后利用微卫星分型数据进行判别分析 进而得到累代选育对虾新品种 |
| 文蛤微卫星标记的检测方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112746.2, 申请日期: 2013-01-02, 公开日期: 2013-01-02
发明人: 刘保忠; 卢霞; 王鸿霞
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文蛤微卫星标记的检测方法 其特征在于：首先利用文蛤est序列获取微卫星标记的微卫星核心序列 所述特异性引物为正链：5’?tcccaggaacgattgttagg?3’ 并在其序列两端设计特异性引物并进行pcr扩增 负链：5’?agcattcacgacaccaacat?3’。 对pcr产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 从而检测文蛤个体的基因型 及在此微卫星位点的遗传变异 获得文蛤该位点的遗传多态性图谱 |
| 一种区分长心卡帕藻与细齿麒麟菜的微卫星标记及其特异性引物和应用 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210249152.6, 申请日期: 2012-10-31, 公开日期: 2012-10-31
发明人: 张振; 刘建国; 庞通; 李凌; 林伟
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细齿麒麟菜的微卫星标记为seq.id.no6?10碱基序列所示。 一种区分长心卡帕藻与细齿麒麟菜的微卫星标记 其特征在于：长心卡帕藻微卫星标记为seq.id.no1?5碱基序列所示 |
| 一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210112325.X, 申请日期: 2012-10-10, 公开日期: 2012-10-10
发明人: 卢霞; 王鸿霞; 刘保忠
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一种适用于文蛤家系鉴定的微卫星标记方法 gc含量为40％?60％ 包括微卫星位点来源、引物设计、引物优化和微卫星标记家系鉴定体系 2)引物设计：在微卫星重复的侧翼序列利用软件primer?premier?5.0设计引物 退火温度为45?65℃ 其特征在于：1)微卫星位点的来源：提取文蛤的基因组dna利用提取的dna 引物设计条件为：引物长度为19?25mer 预期pcr产物长度为100?400bp 采用限制性内切酶法获得文蛤基因组dna片段 并构建微卫星磁珠富集文库 检测阳性克隆 3)引物优化：根据不同引物的tm值进行温度梯度优化 经测序得到含有微卫星重复的dna序列 在tm值上下各10℃ 4)微卫星标记家系鉴定体系的确立：微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)衡量 温度梯度优化扩增得到的pcr产物用8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳?eb染色系统进行检测 根据上述优化获得的ta值 选取杂带较少、特异性产物亮度较高的pcr反应对应的温度为该引物的最佳退火温度ta 选取多个体作为群体进行计算微卫星位点的多态性水平可用信息含量值(Pic)进而衡量多态性信息 根据pic值 Pic小于0.25的标记 筛选得到重复性好、稳定性好 Pic值大于0.25的位点 作为文蛤微卫星标记家系鉴定体系 用于文蛤的家系区分与个体识别。 |
| 一种三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200810160014.4, 申请日期: 2010-06-16, 公开日期: 2010-06-16
发明人: 崔朝霞; 谭烽; 王春琳; 吴丹华; 栾维莎
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一种三疣梭子蟹快速生长品系的构建方法 其特征在于：利用选育材料的基因组微卫星作为分子标记 根据分子标记得到遗传结构中存在生殖隔离明显的群体作为杂交群体 杂交群体进行杂交组合 即得三疣梭子蟹快速生长品系。 |
| 一种中华绒螯蟹多元高通量遗传标记系统及遗传分析方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910020751.9, 申请日期: 2009-12-30, 公开日期: 2009-12-30
发明人: 崔朝霞; 王鸿霞; 吴丹华; 刘 媛; 李倩倩
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1.一种中华绒螯蟹多元高通量遗传标记系统 R：caccagaaataatgaggttt) 其特征在于：所述多元高通量遗传标记系统为线粒体序列信息系统和微卫星分子标记系统 系统1由7个est-ssr标记组成 Ne12(F：atgacattgatgcctgacg 其中微卫星分子标记系统为由7个est-ssr标记的系统1和6个est-ssr标记的系统2组成 扩增7个est-ssr标记的7对引物分别是ne5(F：cgtgaatgctgtagtgtaat R：tgcctttattgaccgagac) Ne16(F：tttcacatcctccacagaca R：gccacaagtacacccaatca) Ne27(F：acgggaaatggaacagat R：tccttccatcctgagtcc) Ne46(F：actgctgttgttggtggtc R：ccttaatccgttgcgtca) Ne48(F：aaaggtcagttaatttcttgat R：tctagtgaaatgacatattggt) Ne49(F：agaccgctgttatgctcct R：atgggaatgaaggttatgtatg) R：cagagccacaacactaacg) 系统2由6个est-ssr标记组成 Ne18(F：tattcaacatttcaacaacgat 扩增6个est-ssr标记的6对引物分别是ne1(F：cattccaagtcttgacccc R：gacgagcgaagaactgga) Ne23(F：agaggcaaatgcgataaaga R：cacgacagacttaccagcac) Ne25(F：aggaggtgcgtaagagtga R：tttccttccatcctgagtc) Ne26(F：acgggaaatggaacagat R：tccttccatcctgagtcc) Ne36(F：atgtggactgcgggaga R：gtggtggtaggttcgtctgt)。 |
| 一种三疣梭子蟹多元高通量遗传标记系统及遗传分析方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200910015428.2, 申请日期: 2009-10-28, 公开日期: 2009-10-28
发明人: 崔朝霞; 王鸿霞; 谭 烽; 刘 媛; 吴丹华
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1.一种三疣梭子蟹多元高通量遗传标记系统 R：gtcttccactcccttactgt) 其特征在于：所述多元高通量遗传标记系统为线粒体序列信息系统和微卫星分子标记系统 系统1由7个ssr标记组成 P04(F：gccactatcttgctgaggttga 其中微卫星分子标记系统为由7个ssr标记的系统1和6个ssr标记的系统2组成 扩增7个ssr标记的7对引物分别是e13(F：aaggaggaggctttgatatg R：gccatagcacgaacacttttga) E20(F：cctcagggcagctctggat R：cccggactaggtgacaggtt) E24(F：aactatgggtcctgagtatta R：ctcggtttctgtccactt) C13(F：ctgtctgatgagtgaggctac R：tgaccacgaggaaaggag) C31(F：tataagggcttaagtgtacg R：gatctaaactcaaggcaaaa) H4(F：aatcacttcactacacctttt R：cttgatgggtggcagtct) R：acaagatccttcgtggtggg) 系统2由6个ssr标记组成 E18(F：ccacaactgcaaacacct 扩增6个ssr标记的6对引物分别是e9(F：tactgagacgccgctggtta R：ttggcattttcatcacttac) E28(F：cgttactgaaagagtggtgaa R：gcagaggttgtaccaccg) C14(F：agtgagattaacgcaact R：catctttcattacaggga) H13(F：atgggcaagcctcttaatgt R：ggatcttcgggtaggactga) E17(F：ataaatatcttggaagccctca R：acgccacatagaacactcactc)。 |
