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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
Inventors:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  冯金华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  孟祥涛;  崔金会
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对ph7.820mm?tris?hcl缓冲液透析过夜  破碎后低温离心  然后低温离心  3)将步骤2)所得上清液过滤  收集上清液  收集上清液  而后将其上含deae?sepharosefast?flow的阴离子交换树柱进行分离  4)将步骤3)用截留分子量为3kda的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂superdex75柱纯化分离  待用  待用  首先采用ph7.820mmtris?hcl缓冲液洗脱  采用含有浓度为0.15?0.5m的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液洗脱  而后采用含有浓度分别为0.1?2m不同浓度的nacl的ph7.820mm?tris?hcl缓冲液进行梯度洗脱  流速为0.2?0.5mlmin?1  收集各洗脱峰  收集各洗脱峰  而后用截留分子量为3kda的超滤管浓缩  其中流出体积50ml?80ml内的组分即为热激蛋白60。  待用