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一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
Inventors:  李鹏程;  李荣锋;  于华华;  邢荣娥;  刘松;  秦玉坤;  李克成;  李冰;  孟祥涛;  崔金会
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  收集采用含0.2m?nacl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  所述洗脱液为含不同浓度nacl的磷酸缓冲液  滤液经含deae?sepharose?fast?flow阴离子交换柱  Nacl浓度分别为0、0.1、0.2、0.3和2m  采用洗脱液以1?3mlmin?1流速进行纯化分离  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  收集洗脱液在低温下用3~5k的超滤管进行浓缩  滤液经凝胶色谱柱superdex200采用0.15m?nacl  待用  10~50mm  ph7.0pbs缓冲液以0.2~1.0mlmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱体积处于60~80ml的洗脱液  而后在2~6℃下用3~5k的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。