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一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
发明人:  朱香萍;  尤锋;  张培军;  孙威;  徐永立
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权利要求书1、一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法  其特征在于包括步骤如下:①采用改进的哌嗪-n  ②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵  N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定  并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来  ③在常温下用浓度百分比为1-2%的triton-100对样品进行打孔处理  受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时  再在含有80-200mm Nabh4的磷酸盐缓冲液中  其中:磷酸盐缓冲液成分为128mm Nacl  磷酸吐温缓冲溶液清洗  室温下抚育6-16小时  2mm Kcl  ④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色  然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存  8mm Nah2po4  其中:抚育抗体前非特异结合位点不封闭  抚育一抗过夜  抗体稀释液含有浓度百分比为10%的山羊血清和5%的二甲亚砜的tris盐酸缓冲液  待用  2mmkh2po4  抚育二抗为避光2-4小时  清洗液为含有155mm Nacl、10mm Tris-cl、ph为7.2-7.4的tris盐酸缓冲液  ⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。  Ph 7.2-7.4  及诺纳德p-40  其中诺纳德p-40占tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2%  
鹰爪虾卵子激活及卵裂的研究 期刊论文
动物学报, 2000, 期号: 1, 页码: 64-70+124-125
作者:  吴长功;  相建海;  刘瑞玉
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鹰爪虾  卵子激活  卵裂  激光扫描共聚焦显微镜  
激光扫描共聚焦显微镜在海洋生物学中的应用 期刊论文
海洋科学, 1998, 期号: 6, 页码: 3-5
作者:  吴长功;  相建海
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共聚焦显微镜:8019  激光扫描:4292  海洋生物学:2730  光学切片:1526  图像处理:1377  电子显微镜:1281  ca2+波:1181  受精卵:929  内胚层细胞:920  生理生化成分:909