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中国科学院海洋研究所机构知识库
Knowledge Management System Of Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
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研究单元&专题
实验海洋生物学重点实... [4]
作者
谭训刚 [1]
文献类型
专利 [4]
发表日期
2013 [1]
2011 [1]
2007 [2]
语种
中文 [4]
出处
资助项目
实验海洋生物学重点实... [1]
收录类别
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文献类型:专利
专题:实验海洋生物学重点实验室
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文昌鱼胚胎仔稚幼鱼循环水人工控制孵育系统
专利
专利类型: 实用新型, 专利号: CN201220662997.3, 申请日期: 2013-05-22, 公开日期: 2013-05-22
发明人:
谭训刚
;
孙威
;
徐永立
;
张培军
;
尤锋
Adobe PDF(2385Kb)
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提交时间:2014/08/04
一种文昌鱼胚胎仔稚幼鱼循环水人工控制孵育系统
其特征在于:包括框架结构(4)、孵育容器(3)、恒温控制系统
其中框架结构(4)上设有多个孵育容器(3)
各孵育容器(3)均与恒温控制系统连接
通过恒温控制系统使孵育容器(3)内的胚胎仔或稚幼鱼生存在恒温环境中。
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总DNA的简便快速方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027643.1, 申请日期: 2011-08-24, 公开日期: 2011-08-24
发明人:
尤锋
;
吴志昊
;
王伟
;
徐冬冬
;
张毅
;
张培军
;
徐永立
Adobe PDF(757Kb)
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收藏
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浏览/下载:574/2
  |  
提交时间:2014/08/04
1尾仔鱼/0.05?0.5ml无水乙醇
一种提取单个鱼卵仔鱼微量总dna的简便快速方法
其特征在于:1)样品固定:采集鱼卵或仔鱼
滤去水后立即加入无水乙醇
2)样品中固定液的去除:取步骤1)所得已固定的单个鱼卵或仔鱼样品
而后于?20℃或室温保存备用
加入生理盐水洗涤
3)样品消化:取上述洗涤过的单个鱼卵或仔鱼
鱼卵或仔鱼与无水乙醇比例为:1ml鱼卵/2?5ml无水乙醇
1000?2000g离心20?60秒去除多余生理盐水
加入100?300μl?dna提取缓冲液和10?30μl细胞裂解缓冲液
4)提取总dna:将步骤3)消化至澄清的溶液中加入100?300μl?5?6mol/l?nacl溶液
再用滤纸吸干样品
使细胞破壁
震荡20?30秒。15000g离心30分钟
重复2?3次
而后将细胞破壁的单个鱼卵或仔鱼加入10?100μg蛋白酶k和10?100μg?rna酶
吸取上清液使蛋白质去除
震荡混匀
然后在上清液中加入等体积异丙醇
于50?70℃温育
轻轻混匀
每10?20分钟颠倒混匀一次
?20℃静置1?2小时
消化至溶液澄清
15000g离心15分钟
待用
沉淀即得到单个鱼卵仔鱼微量总dna。
一种海水鲆鲽鱼类受精卵的组织切片方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: ZL200410050434.9, 申请日期: 2007-12-05, 公开日期: 2011-07-15
发明人:
孙威
;
尤锋
;
张培军
;
徐永立
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浏览/下载:358/0
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提交时间:2011/07/15
一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色观察方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200510047579.8, 申请日期: 2007-05-02, 公开日期: 2007-05-02
发明人:
朱香萍
;
尤锋
;
张培军
;
孙威
;
徐永立
Adobe PDF(674Kb)
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浏览/下载:314/1
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提交时间:2014/08/04
权利要求书1、一种鲆鲽鱼类受精卵微管骨架免疫荧光染色和显微观察方法
其特征在于包括步骤如下:①采用改进的哌嗪-n
②在解剖镜下挑选出发育状态正常的受精卵
N’-双2-乙烷磺酸配制的甲醛-戊二醛固定液对样品进行固定
并用解剖针将胚盘从整个受精卵中剥离出来
③在常温下用浓度百分比为1-2%的triton-100对样品进行打孔处理
受精卵在该固定液中室温下抚育3-6小时
再在含有80-200mm Nabh4的磷酸盐缓冲液中
其中:磷酸盐缓冲液成分为128mm Nacl
磷酸吐温缓冲溶液清洗
室温下抚育6-16小时
2mm Kcl
④采用改进的间接免疫荧光染色步骤对样品进行染色
然后在磷酸吐温缓冲溶液中于4℃下保存
8mm Nah2po4
其中:抚育抗体前非特异结合位点不封闭
抚育一抗过夜
抗体稀释液含有浓度百分比为10%的山羊血清和5%的二甲亚砜的tris盐酸缓冲液
待用
2mmkh2po4
抚育二抗为避光2-4小时
清洗液为含有155mm Nacl、10mm Tris-cl、ph为7.2-7.4的tris盐酸缓冲液
⑤用荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜进行观察。
Ph 7.2-7.4
及诺纳德p-40
其中诺纳德p-40占tris盐酸缓冲液浓度百分比的0.1-0.2%