Institutional Repository of Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
| RSK4基因表达及其对U87细胞增殖的影响 | |
| 李田田 | |
| 学位类型 | 硕士 |
| 导师 | 林秀坤 |
| 2011-05-19 | |
| 学位授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 关键词 | Rsk4基因 真核表达 载体构建 基因转染 |
| 摘要 | 核糖体S6蛋白激酶(ribosomal S6 kinase，RSK)是1985年Erikson和Maller在非洲爪蟾卵中发现一种90 kD的细胞间丝/苏氨酸蛋白激酶，它可以使40 S核糖体亚单位S6蛋白发生磷酸化，从而促进某些mRNA的翻译，这种蛋白激酶被命名为RSK或p90rsk。哺乳动物有4个 p90Rsk基因, 命名为 RSK1-4 (RPS6K A1, A3, A2, and A6)。RSK1-4有73–80%的氨基酸一致性，基本结构相同，都有两个功能蛋白激酶结构域和一个连接区，序列不同点在末端和连接区，这可能决定了各亚型的不同功能。 RSK4（Ribosomal S6 kinase 4）是研究最少的RSK蛋白家族成员，目前已有研究证明RSK4能抑制乳腺癌细胞的生长、侵袭和迁移，可能是乳腺癌的抑癌基因，在肾癌和结肠癌中也发现RSK4 mRNA水平表达下调，且已经发现RSK4能抑制结肠癌细胞系HCT116的生长。但是RSK4的功能的研究才刚刚开始，有许多方面尚不清楚。 本研究构建了人RSK4基因的真核表达系统， 研究其对胶质瘤的调控作用。为阐明RSK4功能奠定基础。采用RT-PCR法从人正常乳腺上皮细胞MCF-10A细胞中扩增获得RSK4基因的编码区，定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)上，构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/RSK4。脂质体法介导pcDNA3.1(-)/RSK4质粒转染至U87细胞中，RT-PCR和Western blot检测表达情况。采用免疫亲和层析柱法初步纯化RSK4蛋白发现有两个明显的蛋白条带。采用MTT法检测RSK4基因对U87细胞生长的影响。结果表明，转染pcDNA3.1(-)/RSK4组U87细胞明显被抑制（P＜0.05），提示RSK4可以抑制胶质瘤细胞的生长。 |
| 语种 | 中文 |
| 文献类型 | 学位论文 |
| 条目标识符 | http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17758 |
| 专题 | 实验海洋生物学重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 李田田. RSK4基因表达及其对U87细胞增殖的影响[D]. 中国科学院研究生院,2011. |
| 条目包含的文件 | ||||||
| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| RSK4基因表达及其对U87细胞增殖的影（712KB） | 限制开放 | CC BY-NC-SA | 浏览 | |||
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