IOCAS-IR  > 实验海洋生物学重点实验室
虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选
冯宁宁
学位类型硕士
导师李富花
2013-04
学位授予单位中国科学院研究生院
学位专业海洋生物学
关键词脊尾白虾 白斑综合征病毒 酶活性 基因转录 中国明对虾 免疫缺陷因子
摘要白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)作为危害虾类养殖业最为严重的病原,已给虾类养殖业造成了严重的经济损失。随着疾病的爆发给虾类养殖业带来越来越多的挑战,人们更加注意到虾类免疫相关领域研究的重要性。对虾类免疫相关基因的研究,有助于理解虾的免疫防御机制,为病害控制提供指导;另一方面,虾类抗病指标的筛选不仅可以为合理评价虾的健康状态提供参考,同时也可为遗传育种提供指导。本论文在克隆了中国对虾IMD基因的全长cDNA的基础上研究了虾类IMD基因的功能,并以实验室常年养殖的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda Holthuis)作为WSSV感染对虾的模式动物,通过人工感染WSSV获得了对WSSV耐受的虾,比较WSSV耐受虾和对照虾在免疫酶活性、耐受虾、濒死虾与对照虾基因转录水平的差异,以期筛选虾类抗病的检测指标。主要进展如下: 克隆了中国明对虾IMD基因(FcIMD)的全长cDNA序列,包含了483 bp的开放阅读框,编码160个氨基酸。FcIMD与在其他虾类中报道的IMD基因具有很高的相似性。FcIMD基因在对虾不同组织中的转录水平表现出明显的差异;攻毒实验中,在细菌注射1小时后,FcIMD基因的转录出现明显的上调表达;WSSV注射的早期,FcIMD基因的转录表达出现了明显的上调与下调表达,表明FcIMD在病原刺激的早期发挥了重要作用。为了解虾类IMD基因与Relish、Dorsal和JNK调节的信号通路的关系,我们利用dsRNA干扰的方法研究了在FcIMD基因干扰后,FcRelish、FcDorsal、FcJNK以及不同抗菌肽基因的转录表达变化,发现Relish和不同抗菌肽的转录表达明显降低,而Dorsal、JNK的转录没有明显变化,由此推断IMD参与了Relish调控的信号通路。 以脊尾白虾为实验材料,以人工注射WSSV后稳定存活的脊尾白虾作为WSSV耐受群体(命名为Rm),以注射PBS的虾作为对照群体(命名为Vm),以注射WSSV后发病濒死的虾作为濒死群体(命名为Am),分析比较了Rm群体和Vm群体的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。Rm群体的ACP和AKP活性均显著低于Vm群体(P<0.05),而两群体在SOD活性上无显著差异(P>0.05)。为进一步检验WSSV耐受群体是否比未经历过病毒感染的虾具有更高的抗WSSV的能力,我们以实验室养殖过程中经过WSSV自然感染后存活的脊尾白虾作为抗性群体(命名为Rn),以未经历过WSSV感染的脊尾白虾作为普通群体(Vn),进行WSSV人工注射攻毒,观察它们在WSSV感染后的存活率,结果显示Rn群体攻毒后存活率为33.2%,显著高于Vn群体的存活率15.1%(P<0.05)。说明ACP和AKP有可能作为虾类抗WSSV能力的评价指标。 根据脊尾白虾在WSSV爆发前后的转录组数据,选取WSSV爆发前后差异表达的基因45条,利用定量PCR检测其在Rm群体、Vm群体以及Am群体的转录表达水平,结果发现有四个基因的表达在Vm与Am群体有显著性差异,它们分别为:VWC结构域蛋白、磷酸丙糖异构酶、层粘连蛋白亚基、脱氢还原酶,这些基因有可能作为潜在的指示脊尾白虾健康状况的指标。
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17748
专题实验海洋生物学重点实验室
推荐引用方式
GB/T 7714
冯宁宁. 虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选[D]. 中国科学院研究生院,2013.
条目包含的文件
文件名称/大小 文献类型 版本类型 开放类型 使用许可
虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选(11874KB) 限制开放CC BY-NC-SA浏览
个性服务
推荐该条目
保存到收藏夹
查看访问统计
导出为Endnote文件
谷歌学术
谷歌学术中相似的文章
[冯宁宁]的文章
百度学术
百度学术中相似的文章
[冯宁宁]的文章
必应学术
必应学术中相似的文章
[冯宁宁]的文章
相关权益政策
暂无数据
收藏/分享
文件名: 虾类IMD基因的功能分析及抗病指标的筛选-冯宁宁.pdf
格式: Adobe PDF
此文件暂不支持浏览
所有评论 (0)
暂无评论
 

除非特别说明,本系统中所有内容都受版权保护,并保留所有权利。