Institutional Repository of Key Laboratory of Experimental Marine Biology, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences
| 两种海藻热休克蛋白hsp70基因结构及表达分析 | |
| 张海宁 | |
| 学位类型 | 硕士 |
| 导师 | 段德麟 |
| 2011-05-18 | |
| 学位授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 关键词 | 浒苔 海带 Hsp70 结构 表达 |
| 摘要 | 浒苔是潮间带典型的绿藻，海带是潮下带典型褐藻。这两种海藻均有重要的经济及生态价值。全球气候变化导致海水环境变化，给浒苔和海带增加了环境胁迫的压力。因此，开展浒苔、海带hsp70基因的结构及功能研究，对了解大型海藻与逆境的关系，特别是研究海藻抗逆生理的机制具有重要意义。 通过克隆分析获得了浒苔hsp70基因全长序列4795 bp，含有5个内含子6个外显子。推测浒苔hsp70内含子可能具有调控功能。上游调控区为1471 bp，含有多个顺式调控元件。通过荧光定量表达分析，研究了不同胁迫条件下浒苔hsp70的转录变化。结果表明在25 ℃处理条件下，浒苔hsp70 mRNA表达量最低。在不同盐度（0-56‰）处理中，低盐（0‰）和高盐（56‰）都引起hsp70 mRNA的大量表达。在紫外照射（0-4 h）条件下，浒苔hsp70 mRNA表达量在2.5 h达到最高。在干燥处理3 h条件下，浒苔hsp70 mRNA表达量无显著变化，3 h后mRNA表达量下降。通过构建原核表达体系，进行体外表达，得到了70 kDa重组蛋白。Western blot检测证明重组蛋白带有组蛋白标签，为浒苔HSP70的结合位点分析打下基础。 获得了海带hsp70基因全长为6682 bp，含有3个内含子4个外显子，内含子中含有调控元件序列，推测其具有调控功能。上游调控区为1597 bp，含有多个顺式调控元件（如HSE、GC box、CAAT box、TATA box等），推测部分顺式元件可能参与调控了海带hsp70表达。通过体外表达和电泳检测，证明获得了72 kDa的重组蛋白，且5 h重组蛋白的表达量达到最大，之后表达量没有明显增加。 |
| 语种 | 中文 |
| 文献类型 | 学位论文 |
| 条目标识符 | http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17745 |
| 专题 | 实验海洋生物学重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 张海宁. 两种海藻热休克蛋白hsp70基因结构及表达分析[D]. 中国科学院研究生院,2011. |
| 条目包含的文件 | ||||||
| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| 两种海藻热休克蛋白hsp70基因结构及表（2370KB） | 限制开放 | CC BY-NC-SA | 浏览 | |||
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