IOCAS-IR  > 实验海洋生物学重点实验室
虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究
其他题名In vitro expression and purification of rainbow trout (oncorhynchus mykiss)TNFα
蔡中华1; 宋林生1; Zou Jun2; C J Secombes2; 董双林3
2003
发表期刊水生生物学报
ISSN1000-3207
卷号27.0期号:006页码:596-601
摘要将虹鳟两种肿瘤坏死因子TNFα和TNFα2基因的成熟肽编码区域,用带有BamHI和HindⅢ酶切位点的基因特异性引物进行:PCR扩增。扩增片段用限制性内切酶消化并连接到pQE30表达载体上,连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细菌中。转化子经PCR筛选,质粒测序,完成了虹鳟两种TNFα基因重组子的构建。重组子经体外培养和诱导后,获得了高效表达的TNFα重组蛋白。高效表达的重组TNFα不受诱导剂IPTG的影响,并且由于重组子高效表达而形成了包涵体;重组蛋白产量约占菌体蛋白总量的25%—30%。应用Ni-NTA和固定金属亲和层析(IM-PC)技术,在变性条件下获得了高度纯化的重组蛋白,纯化重组蛋白的产量约为0.5—1mg/L。
关键词肿瘤坏死因子 重组 纯化 基因体外表达 感受态细菌
收录类别CSCD
语种中文
CSCD记录号CSCD:1172109
引用统计
被引频次:4[CSCD]   [CSCD记录]
文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/175523
专题实验海洋生物学重点实验室
作者单位1.中国科学院海洋研究所
2.阿伯丁大学
3.中国海洋大学
第一作者单位中国科学院海洋研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
蔡中华,宋林生,Zou Jun,等. 虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究[J]. 水生生物学报,2003,27.0(006):596-601.
APA 蔡中华,宋林生,Zou Jun,C J Secombes,&董双林.(2003).虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究.水生生物学报,27.0(006),596-601.
MLA 蔡中华,et al."虹鳟肿瘤坏死因子(TNFα)基因体外表达与纯化的研究".水生生物学报 27.0.006(2003):596-601.
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